Cermin Dunia Kedokteran

Fermentasi Antibiotik.

Usman Suwandi

Pusat Penelitian dan Pengembangan PT. Kalbe Farma, Jakarta

PENDAHULUAN

Bioteknologi merupakan interdisiplin yang mencakup bio-

logi molekuler, genetika, biologi sel, mikrobiologi, biokimia

dan teknik kimia. Bioteknologi bertujuan untuk mentrans-

formasi fungsi biologis sel ke dalam proses industri. Di Indo-

nesia, transformasi tersebut masih menghadapi banyak faktor

yang dapat menjadi pembatas seperti tersedianya plant. Pem-

batas operasional seperti air, listrik atau bahan baku dan

manusia sebagai pembatas. Adanya tenaga trampil, ber-

pengetahuan dan berpengalaman merupakan faktor yang

sangat penting dalam proses transformasi tersebut.

Kemampuan bioteknologi menghasilkan substansi alami

seperti antibiotik, enzim, hormon, vitamin, asam amino dan

bahan makanan pada skala besar, telah membuka kemungkin-

an mengembangkan zat-zat lainnya. Adanya kenyataan bahwa

bakteri, yeast dan jamur berfilamen mempunyai masa rege-

nerasi sangat pendek menjadikan mereka organisme yang

ideal untui riset dan produksi berbagai substansi. Reaksi ini

dapat dikendalikan ke arah tertentu dengan menseleksi orga-

nisme dan pengontrolan faktor lingkungan secara tepat. Ke-

berhasilan manusia memanipulasi struktur gen pada saat

ini, memungkinkan transfer gen terseleksi berkemampuan

tinggi ke mikroorganisme yang jelas identitasnya dan mudah

dikembang biakkan. Misalnya bakteri Escherichia coli, orga-

nisme sederhana ini setelah dimanipulasi dapat memproduksi

human insulin di dalam fermentor. Hasil teknologi genetika

ini dan produk-produk lain seperti interferon, antiliodi mono-

klonal, saat ini telah menjadi bagian bioteknologi modem.

Dalam pengembangan proses produksi bioteknologi, pada

tahap awal perlu mengoptimasi kondisi biakan dalam sistem

pertumbuhan skala kecil. Hasil yang diperoleh dari skala kecil

ini kemudian ditransfer ke skala yang lebih besar. Teknik ini

membutuhkan pengetahuan dan ketrampilan untuk mencapai

hasil yang memuaskan. Teknik shake culture merupakan

tahap awal yang ideal terutama untuk fermentasi submerged.

Tahap selanjutnya dilakukan dalam fermentor laboratorium

di bawah kontrol kondisi yang dapat diulang sebelum me-

masuki skala produksi yang lebih besar.

Di dalam plant produksi, fermentasi merupakan bagian

pokok dari proses bioteknologi, misalnya produksi antibiotik.

Fermentasi pada dasarnya merupakan pendayagunaan mikro-

organisme yang aktif secara biologis. Untuk merrtransformasi

substrat menjadi produk yang dikehendaki, suatu mikro-

organisme harus dimanupulasi dan pengontrolan kondisi

lingkungan seperti temperatur, pH, oksigen terlarut merupakan

bagian yang penting dalam fermentasi.

FERMENTASI

Fermentasi biasanya menggunakan satu macam mikro-

organisme yang telah terseleksi. Namun pada fermentasi dual

atau multiple digunakan lebih dari satu mikroorganisme.

Organisme ini dapat diinokulasikan ke dalam substrat secara

simultan. Fermentasi ini dilarutkan untuk menghasilkan produk

yang tidak dapat dilakukan hanya dengan semacam

mikroorganisme saja, atau untuk menghasilkan produk fer-

mentasi yang berbeda tetapi mempunyai nilai ekonomis

lebih tinggi. Sebagai contoh fermentasi untuk memproduksi

cuka, pertama yeast diperlukan untuk menghasilkan etil

alkohol, kemudian Acetobacter digunakan untuk merubah

alkohol menjadi cuka.

Fermentasi d

apat dilakukan dengan cara batch per batch

atau secara kontinyu. Pada fermentasi batch, pertumbuhan

mikroorganisme dan sintesis produk berlangsung dalam media,

kemudian setelah sintesis produk maksimum, semua substrat

diambil bersamaan dan dilakukan proses isolasi produk. Pada

fermentasi kontinu, media nutrien ditambahkan secara terus

menerus, diimbangi dengan pengambilan substrat dari fer-

mentor juga secara terus menerus untuk mendapatkan sel-sel

atau produk fennentasi.

Selama fermentasi diperlukan tempat yang berisi media

bernutrisi untuk pertumbuhan mikroorganisme, sehingga

organisme tersebut dapat berkembang dan menghasilkan

produk yang diinginkan. Di dalam laboratorium, fermentasi

antibiotik dapat dilakukan dengan berbagai cara antira lain:

1) Pada media padat.

Penelitian mikroorganisme penghasil antibiotik biasanya

membutuhkan media padat untuk pertumbuhannya. Misalnya

pada waktu skrining, suspensi mikroorganisme terpilih di-

tumbuhkan pada media padat, setelah inkubasi dalam waktu

cukup, aktivitas antibiotik yang dihasilkan dapat diuji ter-

hadap berbagai bakteri indikator. Dalam hal fermentasi anti-

biotik pada media padat, temperatur dan komposisi media

merupakan faktor yang sangat penting dan menentukan

keberhasilan produksi antibiotik. Untuk mengontrol tem-

peratur supaya konstan dan sesuai dengan yang dikehendaki,

dapat menggunakan inkubator atau alat lain.

2) Pada media cair dengan shaker

Fermentasi antibiotik biasanya menggunakan fermentor

untuk pertumbuhan biakan submerged. Namun jika fermentor

tidak tersedia, teknik shake flask dapat dipakai untuk meng-

gantikannya, tetapi dengan kondisi lebih terbatas dan kontrol

parameter kurang optimum dibandingkan dengan fermentor.

Teknik ini biasanya digunakan untuk berbagai percobaan

fermentasi pendahuluan sebelum menggunakan fermentor

sebenarnya. Sebagai con toh, setelah organisme diperoleh

sebagai biakan murni, maka perlu memeriksa karakteristik

biokimia atau morfologi mereka dengan menumbuhkannya

pada kondisi biakan submerged. Untuk tujuan tersebut teknik

shake flask dapat digunakan karena sederhana dan dapat

memberikan informasi yang hetguna. lnformasi yang dapat

diperoleh dri percobaan dengan teknik ini antara lain, kom-

posisi medium, tingkat aerasi, pola pH dan parameter-para-

meter yang berkaitan dengan pertumbuhan dan produk yang

dihasilkan.

Pengaturan temperatur dapat dilakukan dengan mengguna-

kan inkubator shaker atau dengan meletakkan shaker pada

ruangan yang dikontrol temperaturnya misalnya dengan

menggunakan heater dan termostat untuk mengontrol tem-

peratur yang diperlukan.

Flask dapat menggunakan baffled flask atau plain flask.

Pada baffled flask laju transfer oksigen akan lebih tinggi

dan biasanya menyebabkan terjadinya buih. Agitasi pada

shake flask selain memberikan aerasi juga memungkinkan

transfer substrat dan organisme. Pada waktu fermentasi meng-

gunakan shake flask, biasanya akan terjadi kehilangan air

dari medium karena evaporasi. Seperti pernah diamati oleh

Solomons (1969) pada medium biakan 100 ml dalamflask.

1000 ml dengan waktu inkubasi 48 jam pada temperatur

37°C, agitasi menggunakan reciprocating shaker laju transfer

oksigen ± 55 mMO

/ 1 /jam, maka kehilangan air mencapai

20%. Untuk mengimbangi kehilangan air ini, ke dalam me-

dium dapat ditambahkan akuades.

Teknik shake flask pertama kali dilakukan oleh Kluyver

dan Perquin (1933). Pada dasarnya ada dua macam meka-

nisme dari teknik ini.

Reciprocating shaker. Variasi dapat dilakukan dengan

mengatur panjang stroke. Keuntungan alat ini, secara mekanis

lebih sederhana dibandingkan rotary shaker. Kecepatannya

dapat diatur misalnya 60 120 stroke per menit. Panjang stroke

juga dapat diatur misalnya 4 8 cm. Alat ini paling sesuai

digunakan untuk menumbuhkan organisme uniseluler bakteri

dan yeast.

Rptary shaker, bergerak dengan arah melingkar. Variasi

dapat dilakukan dengan mengatur panjang radius orbit. Alat ini

dianggap sebagai tipe standar karena dapat digunakan untuk

menumbuhkan semua mikroorganisme termasuk sel

tanaman dan hewan. Alat ini selain mempunyai kekuatan

senfrifugal juga harus mampu beroperasi pada kecepatan

tinggi. Kecepatan dapat diatur misalnya antara 100 400 rpm

dan radius orbit juga dapat diatur misalnya 1 5 cm.

Pada media cair dengan fermentor

Teknik shake flask dengan rotary shaker atau reciprocating

shaker merupakan cara konvensional dan berguna pada tahap

pendahuluan proses fermentasi, penelitian dan pengembangan

dalam laboratorium fermentasi. Namun cara ini akan memberi-

kan estimasi kondisi fermentasi skala besar yang kurang baik

mengenai potensi mikroorganisme dalam mensintesis produk.

Oleh karena itu untuk mendapatkan estimasi kondisi fermen-

tasi yang ideal perlu menggunakan fermentor volume kecil.

Karena kondisi fermentasi dalarn fermentor kecil ini akan

lebih menggambarkan kondisi fermentasi skala besar yang

sebenarnya.

Fermentor berfungsi menyediakan lingkungan bagi per-

tumbuhan organisme atau sel di bawah kondisi terkontrol.

Dalam industri fermentasi, fermentor harus memungkinkan

pertumbuhan dan biosintesis paling baik bagi biakan mikroba

(yang bermanfaat bagi industri) dan memberikan kemudahan

untuk manipulasi semua operasi yang berhubungan dengan

penggunaan fermentor. Fermentor harus dilengkapi pengontrol

dan pengatur kondisi fermentasi misalnya kontrol temperatur

dengan mengatur pemanas atau pendingin, kontrol pH dengan

menambah asam atau alkali, kontrol agitasi dengan mengatur

kecepatan stirrer dan ukuran impeller, kontrol aerasi dengan

mengatur aliran gas dan kecepatan stirrer dan sebagainya.

Bejana biakan merupakan bagian pokok dari setiap fermentasi,

karena di dalam bejana inilah proses biologis akan berlangsung.

Oleh karena itu bejana ini harus terjamin keamanannya selama

proses berlangsung dan tahapan operasional dapat dilakukan

dengan mudah. Bejana harus cukup kuat untuk menahan

tekanan dari media dan udara. Penyusunannya harus tidak

terkoreksi oleh produk fermentasi dan tidak melepaskan ion

toksik ke media pertumbuhan.

Fermentasi biasanya memerlukan waktu lama. Operasinya

dapat berlangsung beberapa hari, bahkan pada fermentasi

kontinu dapat berlangsung beberapa minggu. Fermentasi

berlangsung pada kondisi aseptik, jadi fermentor harus men-

jamin sterilitas kandungannya dan terpeliharanya kondisi

aseptik selama periode operasi. Demikian juga alat-alat pe-

nambah inokulum, antifoam, nutrien, asam atau alkali dan

sebagainya harus menjamin kondisi aseptik dan mencegah

terjadinya kontam inasi mikroba yang tak dikehendaki.

Berdasarkan proses penyebaran organisme dan media

dalam bejana, Bull et.al. mengelompokkan jenis fermentor

ke dalam 3 grup :

Reaktor dengan agitasi internal. Merupakan biorekator

yang paling lazim digunakan di berbagai industri fermentasi.

Grup ini termasuk stirred tank reactor.

Bubble column bioreactor. merupakan bioreaktor paling

sederhana. Terdiri dari tabung panjang dengan beberapa

sparger di bagian dasarnya. .

Loop reactor. Merupakan collumn reactor di tnana per-

campuran dan sirkulasi diinduksi dengan alat-alat tertentu.

Berdasarkan penggunaan alat tersebut, fermentor ini di-

kelompokkan atas tiga jenis:

a ) Air lift loop reactor .

Pro peller'loop reactor.

Jet loop reactor .

Semua sistem fermentasi memerlukan homogenitas media

maupun mikroorganisme. Sistem agitasi memungkinkan

distribusi tersebut dengan meniadakan gradien konsentrasi

seperti unsur media, pH, temperatur dan sebagainya. Sistem

fermentasi aerob, merupakan proses industri fermentasi yang

sangat penting. Dalam fermentasi aerob, selain tugas tersebut

sistem agitasi mempunyai tugas tambahan memecah gelem-

bung udara besar menjadi gelembung yang lebih kecil untuk

menambah area permukaan gas dan membantu mentransfer

oksigen ke dalam biakan serta menyebarkann oksigen. Impeller

mempunyai peranan penting untuk menyelesaikan tugas ter-

sebut dan keberhasilannya tergantung pada beberapa faktor

antara lain kekuatan atau kecepatan rotasi, ukuran dan desain

impeller, densitas dan viskositas substrat, kecepatan aliran

gas dan sebagainya.

Ada beberapa tipe impeller yang biasanya digunakan dalam

fermentor antara lain disc turbine, vaned disc, open turbine

dan marine propeller. Disc turbine merupakan tipe impeller

yang paling lazim digunakan di berbagai industri fermentasi.

Cara bekerjanya untuk melakukan aerasi dan agitasi dapat

dikelompokkan ke dalam dua kelompok:

Impeller bekerja tanpa baffle. Jika impeller cukup cepat,

maka akan terjadi vortex dari permukaan substrat, sehingga

menarik udara ke dalam sistem. Tipe sistem fermentor ini

juga disebut sebagai vortex aeration. Keunturigan sistem ini

aerasinya efisien yaitu aerasi berlangsung cukup baik tanpa

tenaga relatif besar. Sedang kerugiannya yaitu kesukaran

untuk scale up karena kesulitan mendapatkan kesamaan

aliran pada dua ukuran bejana yang berbeda.

Impeller bekerja menggunakan baffle. Tipe ini paling lazim

digunakan dan biasanya baffle diletakkan vertikal untuk

menghalangi arus perputaran cairan sehingga memungkinkan

substrat mengalami turbulensi.

Sistem fermentasi aerob memerlukan udara steril yang di-

masukkan ke dalam fermentor. Cara yang biasa digunakan

dengan melewatkan udara melalui filter steril. Udara me-

masuki fermentor biasanya melalui pipa yang terletak di

bawah impeller dan udara mengalir melalui sparger. Gas yang

memasuki fermentor dapat menimbulkan tekanan positif di

dalam fermentor, maka laju aliran udara harus dikontrol,

demikian juga sistem pengeluaran gas.

Setiap mikroorganisme mempunyai temperatur pertumbuh-

an berbeda dan kadang-kadang suatu organisme mempunyai

temperatur pertumbuhan berlainan dengan temperatur untuk

produksi antibiotik. Supaya pertumbuhan dan produksi anti-

biotik optimum maka temperatur optimum dalam fermentor

harus dipelihara/dipertahankan. Organisme yang aktif meta-

bolismenya, biasanya menghasilkan panas yang terakumulasi

pada fermentor. Karena itu kontrol temperatur harus di-

lakukan dengan mengalirkan air pendingin.

Pada waktu mikroorganisme mensintesis produk metabolit,

pH substrat dapat mengalami perubahan karena hasil meta-

bolit mungkin sangat alkali atau asam. Tentu perubahan pH

ini tidak disukai oleh mikroorganisme tersebut, karena dapat

mengganggu pertumbuhannya dan pada gilirannya dapat

mempengaruhi pembentukan produk. Untuk menjaga ke-

mungkinan tersebut, selama proses fermentasi berlangsung

ke dalam substrat sering ditambahkan penyangga untuk

memperlambat atau mengurangi perubahan pH yang terlalu

besar. Buffer mungkin hanya sebagai penyangga pH tapi

dapat juga berperan ganda yaitu sebagai penyangga pH dan

sumber nutrien.

MEDIA FERMENTASI

Komposisi media dan kondisi lingkungan merupakan faktor

yang sangat penting bagi keberhasilan proses fermentasi.

Faktor tersebut akan bervariasi tergantung dari organisme

yang digunakan dan tujuan fermentasi. Media harus mengan-

dung

nutrien untuk pertumbuhan, sumber energi, penyusun

substansi sel dan biosintesis produk fermentasi. Komponen

media yang paling penting yaitu sumber karbon dan nitrogen,

karena sel mikroha dan produk fermentasi sebagian besar

tersusun dari komponen ini. Komposisi media dapat sangat

sederhana dan kompleks tergantung pada jenis mikroba

yang digunakan dan tujuan fermentasi. Mikroorganisme

autotrofik misalnya hanya memerlukan media organik yang

sangat sederhana untuk mensintesis semua senyawa organik

kompleks yang diperlukan menopang kehidupan, pertumbuh-

an dan perkembangan sel-sel serta kebutuhan energinya.

Sebaliknya mikroorganisme tertentu memerlukan media yang

tersusun dari komponen sangat sederhana sampai komplek.

Di laboratorium, fermentasi antibiotik dapat dilakukan

dengan media padat atau cair. Pada waktu skrining mikroba

penghasil antibiotik biasanya memerlukan media selektif

dalam bentuk padat. Agen pemadat yang lazim digunakan

adalah agar yaitu polisakarida yang tidak mudah didegradasi

oleh kebanyakan mikroba. Konsentrasi yang digunakan pada

umumnya antara.l,5 2,0%; setelah dipanaskan sampai men-

didih, maka akan menjadi padat sesudah dingin. Media padat

sangat berguna untuk menseleksi dan menguji aktivitas pro-

duksi antibiotik. Pada tahap selanjutnya media cair diperlukan

untuk pertumbuhan biakan submerged.

Media fermentasi antibiotik dapat dikelompokkan ke dalam

media sintetik, semi-sintetik dan crude. Media sintetik yaitu

semua unsumya merupakan senyawa yang relatif murni se-

hingga komposisi dan kuantitas bahanpenyusunnya dapat di-

ketahui dengan jelas. Sedangkan media semi sintetik hanya

sedikit saja komponen yang tidak diketahui. Kedua media

ini sangat berguna pada percobhan awal untuk mengetahui

kemampuan organisme memproduksi antibiotik terutama

untuk mengetahui komponen-komponen yang berperanan

bagi pertumbuhan organisme dan untuk mengetahui kom-

ponen yang dapat memacu pembentukan produk yang di-

kehendaki. Media ini lebih disukai untuk mempelajari faktor-

faktor tersebut karena selain mudah dikontrol juga mudah

dihilangkan atau ditambahkan. Media crude yaitu media

yang komponen spesifknya tidak diketahui misalnya mol-

lase. protein digest, corn steep liquor, yeast extract dan se-

bagainya. Pada tahap akhir suatu skrining, bahan ini mungkin

sangat berharga karena dapat meningkatkan pertumbuhan

dan/atau pembentukan produk dan mungkin akan lebih

ekonomis dalam skla lebih besar. Selain mengandung bahan-

bahan faktor pertumbuhan dan pembentuk produk yang tak

diketahui, media ini juga dapat mengandung zat-zat yang

mempunyai efek penghambat. Faktor lain yang merugikan

yaitu tingginya kandungan protein dapat menyebabkan

buih terutama pada media cair.

Aerasi dan agitasi ,media cair selama berlangsungnya fer-

mentasi dapat menyebabkan buih, terutama pada media

dengan kandungan protein

atau peptida tinggi. Sebaliknya

media yang banyak mengandung komponen anorganik dan

gula relatif kurang menghasilkan buih. Kontaminasi bakteri

proteolitik dapat menyebabkan degradasi protein menjadi

peptida dan gilirannya menyebabkan buih. Untuk mengatasi

buih yang terjadi selama berlangsungnya fermentasi dapat

ditambahkan antifoam ke media fermentasi. Ada berbagai

macam antifoam yang biasa digunakan antara lain lard oil,

corn oil, soy bean oil, oktadekanol, silikon dan sebagainya.

Keberhasilan biosintesis produk selama fermentasi ber-

langsung, kadang-kadang memerlukan prekursor, yang harus

ditambahkan ke dalam media. Misalnya untuk mensintesis

pensilin G, memerlukan prekursor asam fenilasetat atau

untuk mensintesis vitamin B-12 perlu ditambahkan pre-

kursor kobalt anorganik, dan sebagainya. Prekursor merupa-

kan substansi yang dapat meningkatkan hasil dan kualitas

produk; prekursor dapat ditambahkan ke media sebelum

fermentasi berlangsung atau secara simultan.

Untuk fermentasi antibiotik pada umumnya media ino-

kulum berbeda dengan media fermentasi walaupun untuk

beberapa fermentasi mempunyai komposisi media sama.

Perbedaan ini disebabkan fungsi kedua media juga berbeda,

media inokulum menyediakan nutrien supaya sel mikroba

tumbuh dengan cepat, sedangkan media fermentasi terutama

untuk menghasilkan produk yang dikehendaki. Yang perlu

diperhatikan dalam penggunaan komponen media untuk

biosintesis produk adalah faktor adaptasi mikroba. Pemin-

dahan dari media inokulum ke media fermentasi jangan

sampai menyebabkan deadaptasi. Peranan media inokulum

tidak kalah pentingnya dibanding media fermentasi, sehingga

perlu diperhatikan komposisinya. Selain itu jumlah inokulum

juga sangat. mempengaruhi biosintesis produk dalam media

fermentasi. Jumlah inokulum yang dimasukkan ke media

fermentasi biasanya berkisar antara 0,5 5%, tetapi untuk

fermentasi tertentu jumlah inokulum mencapai 20% atau

lebih. Untuk mendapatkan komposisi media inokulum dan

jumlah yang tepat tentu diperlukan serangkaian percobaan

yang memakan waktu dan tenaga.

Keberhasilan teknologi fermentasi tergantung pada peng-

gunaan metode yang menjamin sterilitas media dan hardware

sebelum memasukkan organisme ke dalam medium dan me-

melihara kondisi biakan tetap aseptik. Kadang-kadang kondisi

aseptik juga diperlukan selama pemisahan sel dan produk,

sesudah fermentasi berakhir. Mikroba yang tak dikehendaki

harus dicegah memasuki fermentor bersama gas, suspensi

media, inokulum atau larutan lain yang ditambahkan selama

pertumbuhan sel dan sintesis produk berlangsung, karena

mikroba kontaminan dapat mengubah sifat kimia nutrien,

pH, menimbulkan buih dan menghambat atau memperlambat

pertumbuhan mikroorganisme dan biosintesis produk fer-

mentasi.

Sterilisasi media yang tidak mengandung padatan ter-

suspensi dapat dilakukan dengan panas, agen kimia, UV,

iradiasi ,atau filtrasi. Namun jika media mengandung padatan,

sterilisasi dengan filtrasi tidak mungkin dan yang paling lazim

menggunakan sterilisasi panas. Sterilisasi panas dapat dilaku-

kan dalam bejana fermentasi atau dalam bejana terpisah,

yaitu dengan menaikkan temperatur 121°C pada 103 Kp

gauge pressure (15 psig). Dengan uap bebas udara pemanas-

an selama 5 menit sudah cukup, bila temperatur benar-

benar merata. Bila media pekat atau mengandung konsentrasi

padatan tersuspensi cukup tinggi, maka tidak semua bagian

media dapat mencapai temperatur 121°C pada waktu ber-

samaan, oleh karena itu media dipertahankan 121°C dalam

periode lebih lama. Waktu yang diperlukan untuk sterilisasi

panas, tidak sama antara media sintetik dan crude. Media

crude memerlukan waktu lebih lama karena viskositas media

ini lebih besar sehingga menghalangi penetrasi panas dan spora

bakteri relatif resisten terhadap panas. Namun demikian

pemanasan yang terlalu lama akan dapat merusak berbagai

komponen media yang mudah terdegradasi oleh panas misal-

nya' media yang mengandung enzim atau vitamin, akan rusak

oleh panas yang tinggi.

Untuk menghindari hal tersebut, sterilisasi dapat dilakukan

secara terpisah misalnya dengan filtrasi. Dengan demikian

besar dan lamanya pemanasan merupakan faktor yang perlu

diperhatikan dan sebelum melakukan sterilisasi, evaluasi

setiap komponen media dapat bermanfaat. Gas yang ditambah-

kan ke fermentor seperti karbon dioksida, nitrogen, oksigen

atau gas lain, harus dalam keadaan steril. Sterilisasi dapat di-

lakukan dengan filtrasi, Pipa, klep atau bagian lain untuk

transfer biakan dad bioreaktor satu ke yang lain atau pe-

nambahan inokulum, asam, alkali, antifoam dau lain-lain

juga harus steril. Sterilisasi dapat dilakukan dengan uap.

PENUTUP

Fermentasi berlangsung dalam fermentor selama beberapa

hari dan fermentasi tidak memerlukan banyak tenaga. Manusia

dibutuhkan untuk mengatur dan mengontrol kondisi biakan

selama fermentasi berlangsung seperti pH, temperatur, aliran

udara, oksigen terlarut, antifoam dan sebagainya. Fermentor

yang lebih modern telah dilengkapi dengan alat pengukur

dan pengontrol kondisi biakan secara otomatis. Keberhasil-

an fermentasi selain dipengaruhi kondisi biakan juga ter-

gantung pada persiapan sebelum fermentasi; seperti sterilisasi,

pembuatan media, jumlah inokulum yang sesuai dan sebagai-

nya. Kondisi aseptik harus selalu dipertahankan selama ber-

langsungnya fermentasi karena kontaminasi dapat menyebab-

kan kegagalan biosintesis produk. Untuk menjamin keadaan

tersebut, harus diperhatikan sterilisasi media dan hardware

serta sterilitas gas, media antifoam dan lain-lain yang akan

ditambahkan ke dalam biakan. Bagi banyak orang, sterilisasi

tampaknya sederhana yaitu hanya untuk membinasakan atau

meniadakan kehidupan dalam mated yang disterilkan. Namun

sebenarnya analisis yang terinci dari mated yang disterilkan

akan menghindari kesalahan asumsi yang dapat berakibat

fatal.

Media mempunyai peranan yang penting bagi keberhasilan

fermentasi antibiotik. Media yang murah, mudah didapat,

mudah digunakan dan menghasilkan kuantitas dan kualitas

produk optimum tentu sangat didambakan. Indonesia yang

kaya akan sumber alam mempunyai potensi sangat besar

dalam menyediakan komponen media fermentasi terutama

fermentasi antibiotik seperti kedelai, jagung, kentang, dan

berbagai bahan alami lainnya; karena bahan tersebut me-