Cermin Dunia Kedokteran

HASIL PENELITIAN

Reaksi Imunologis dan Reaksi Samping

Vaksin Polio Oral Buatan Bio Farma

Gendrowahyuhono*, Suharyono Wuryadi*, Mulyati Priyanto*, Yulitasari**, Sinta Purnamasari*, Klino *

*) Badan Penelitian dan Pengetnbangan Kesehatan, Departemen Kesehatan Ri, Jakarta

**) SubDit. Imunisasi, Ditjen PPM & PLP, Departemen Kesehatan RI, Jakarta

PENDAHULUAN

Dalam usaha memenuhi kebutuhan vaksin polio yang cukup

banyak untuk program eradikasi polio di Indonesia, maka Perum

Bio Farma telah memproduksi vaksin polio oral menggunakan

strain standar Sabin; strain vaksin tersebut sudah dipakai secara

luas di dunia, termasuk Indonesia, dan telah terbukti mempunyai

reaksi imunologis (imunogenisitas) yang baik dan reaksi sam-

ping (reaktogenisitas) yang rendah. Teknologi yang digunakan

dalam pembuatan vaksin tersebut berasal dari salah satu pabrik

vaksin terbesar di Jepang yaitu JPRI (Japan Poliomyelitis

Research institute) di Tokyo.

Sebelum dapat dipasarkan di Indonesia, maka vaksin ter-

sebut perlu diuji coba pemberiannya pada anak-anak yang ber-

umur 23 bulan, dengan tujuan untuk mengetahui reaksi imu-

nologis dan reaksi samping vaksin. Dipakainya batasan umur

23 bulan, adalah karena disesuaikan dengan batasan umur

anak dalam program imunisasi yang selama ini dilaksanakan di

Indonesia.

ABSTRAK

Penelitian reaksi imunologis dan reaksi samping vaksin polio oral buatan Bio Farma

telah dilakukan di Yogyakarta pada tahun 1994, dengan tujuan untuk mengetahui apakah

imunogenisitas dan reaktogenisitas vaksin tersebut pada anak-anak berumur 23 bulan

cukup baik, sehingga vaksin tersebut dapat dipasarkan di Indonesia.

Hasil pemeriksaan serologi menunjukkan bahwa seroconversion rate masing-masing

tipe 1, 2 dan 3 adalah 98%, 98% dan 94%, demikian juga seroconversion rate terhadap

ketiga tipe adalah 93%. Pada pengamatan selama 8 hari setelah vaksinasi pertama, kedua

dan ketiga, tidak dijumpai adanya reaksi samping. Hasil isolasi virus hanya menemukan

satu polio tipe-2 sebelum anak mendapat imunisasi, satu Coxsackie-B group dan satu

polio tipe 2 setelah anak mendapat imunisasi.

Berdasarkan hasil penelitian disimpulkan bahwa vaksin tersebut memberikan sero-

conversion rate yang cukup tinggi, baik terhadap masing-masing tipe maupun terhadap

ketiga tipe virus polio, dan tidak ada reaksi samping bila diberikan kepada anak-anak

yang berumur 23 bulan.

Disarankan, program imunisasi di Indonesia dapat menggunakan vaksin polio buatan

Bio Farma, karena ternyata kualitasnya tidak berbeda dengan vaksin yang sekarang di-

gunakan untuk program yaitu buatab dari SK&F atau Pasteur Merieux.

Cermin Dunia Kedokteran No. 117, 1997

BAHAN DAN CARA KERJA

1) Lokasi

Penelitian dilakukan di Yogyakarta, dengan pertimbangan

bahwa dengan Dinas Kesehatan Yogyakarta telah terjalin kerja-

sama yang baik dalam melaksanakan beberapa penelitian se-

belumnya dan sudah tersedia tenaga yang terlatih untuk melaku-

kan pengambilan spesimen darah bayi dan balita, selain itu juga

partisipasi masyarakatnya cukup baik.

2) Sampel

Sejumlah 100 anak sehat yang berumur 23 bulan, belum

pernah sakit polio, belum pernah mendapat vaksin polio dan

berat badan normal, digunakan sebagai sampel dalam penelitian

ini

Anak-anak tersebut diberi OPV buatan Bio Farma sebanyak

tiga kali dengan selang waktu 46 minggu di antara masing-

masing pemberian.

3) Vaksin

Vaksin yang diberikan adalah No. Batch 270063, dengan

dosis 2 tetes, dimasukkan ke dalam mulut.

Titer vaksin yang digunakan adalah Polio-1 = 10

6,0

TCD

;

Polio-2 = 10

5,0

TCD

dan Polio-3 = 10

5,5

TCD

/dosis.

4) Cara pengambilan darah dan tinja

Darah diambil dari vena cubiti sebanyak 2 ml dengan meng-

gunakan syringe dan wing needle. Serum dipisahkan dengan cara

sentrifugasi, dimasukkan dalam vial, kemudian disimpan dalam

freezer (suhu beku) sampai saat dilakukan pemeriksaan.

Tinja diambil sebanyak 8 gram, dengan cara memasukkan

sonde ke dalam rektum. Tinja yang menyemprot keluar ditam-

pung dalam tabung khusus, kemudian disimpan sementara dalam

lemari es atau langsung disimpan dalam freezer.

Darah dan tinja diambil dua kali yaitu pada saat sebelum

vaksinasi dan 1 bulan setelah vaksinasi ke-3.

5) Pemeriksaan serologis

Semua pemeriksaan, serologis dan isolasi virus dilakukan di

Laboratorium Pusat Penelitian Penyakit Menular Jakarta.

Uji netralisasi dengan teknik mikro, sesuai dengan cara

WHO menggunakan sel HEp-2 Cincinnati dan WHO. Antigen

yang digunakan adalah virus polio Sabin 1, 2 dan 3 yang berasal

dari Bio Farma.

Serum yang akan diujiu diencenkan 1:8 dengan medium

MEM dan diinaktifkan pada suhu 56°C selama 30 menit. Dengan

volume yang sama, serum yang sudah diinaktifkan tensebut di-

campur dengan 100 TCID50 virus polio (tipe 1,2 dan 3), dikocok

perlahan-lahan, kemudian diinkubasi pada 37°C selama 2 jam.

Setelah inkubasi selesai, suspensi sel HEp-2 ditambahkan pada

campuran serum-virus tersebut dan diinkubasi lagi pada 37°C

selama 5 hari. Pengamatan ditakukan setiap hari, untuk melihat

adanya CPE (Cytopathogenic Effect).

Adanya netralisasi antara serum dan virus yang dicampur,

dapat diketahui dan pengamatan sel HEp-2 yang tidak menun-

jukkan adanya CPE. Sebaliknya, sel HEp-2 yang menunjukkan

CPE diartikan sebagai tidak ada reaksi netralisasi.

Serum yang mengadakan reaksi netralisasi, diartikan se-

bagai mernpunyai antibodi terhadap virus yang dicampurkan.

Sebaliknya, serum yang tidak menetralisasi virus yang dicam-

purkan diartikan sebagai tidak mempunyai antibodi terhadap

virus tersebut.

Bersamaan dengan setiap uji netralisasi dan serum yang

akan diuji, disertakan juga uji titrasi ulang (back titration) dan

virus yang digunakan, serta serum kontrol untuk melihat toksisi-

tasnya terhadap sel, dan reference homologous antisera yang

sudah diketahui titer antibodinya.

6) Pemeriksaan isolasi virus

Isolasi virus entero dan tinja dilakukan pada biakan sel

HEp-2 dan Vero. Isolasi yang menunjukkan CPE dilanjutkan

dengan identifikasi. Isolasi yang tidak menunjukkan CPE di-

lakukan pasase selama 2 kali, dan apabila sampai 2 kali pasase

tidak menunjukkan adanya CPE dinyatakan sebagai negatip

isolat.

Identifikasi terhadap isolat yang positip dilakukan dengan

menggunakan pool antisera yang didapatkan dan WHO. Pool

antisera tersebut terdiri dari pool antisera polio, Echo dan

Coxsackie virus group. Prosedur pemeriksaan identifikasi sesuai

dengan standard WHO

(1)

7) Test potensi vaksin

Potensi vaksin polio yang akan dipakai dan yang sudah

dipakai di lapangan diuji dengan pemeriksaan titrasi pada cell

HEp-2 yang ditumbuhkan dalam microplate dan tabung.

Vaksin yang diuji potensinya diambil secara random, se-

banyak 1 vial, dan sejumlah vaksin yang akan dipakai untuk

setiap jadual vaksinasi dan 1 vial sisa dan sejumlah vaksin

tersebut.

8) Pengamatan reaksi samping

Setiap kali sehabis vaksinasi, bayi diamati selama 8 hari

oleh petugas kesehatan setempat dengan supervisi peneliti pusat,

untuk melihat dan mencatat dalam formulir yang sudah disedia-

kan adanya gejala reaksi samping yang mungkin terjadi. Gejala

yang diamati adalah : panas, batuk, tenggorokan merah, pilek,

muntah, mencret, kaku kuduk, lumpuh satu kaki atau dua kaki

dan apabila ada kelumpuhan apakah jika dicubit masih ada rasa

atau tidak.

9) Analisis data

Analisis data dan uji netralisasi meliputi:

a) Serokonversi tenhadap ke-3 tipe virus polio.

b) Serokonversi terhadap masing-masing senotipe.

c) Tidak ada serokonversi.

Analisis data dan isolasi virus meliputi:

a) Tinja pertama: semua enterovirus.

b) Tinja kedua: semua enterovirus.

HASIL

1) Pemeriksaan serologis

Pemeriksaan serologis dilakukan terhadap 100 sera dari

bayi-bayi yang mengikuti penelitian dari awal sampai akhir.

Hasil uji netralisasi untuk mengetahui status antibodi anak

dari 100 anak sebelum mendapatkan OPV dan sesudah men-

Cermin Dunia Kedokteran No. 117, 1997 53

dapatkan OPV III dapat dilihat pada Tabel 1. Lima puluh empat

persen anak sebelum imunisasi adalah tripel negatip (tidak

mempunyai antibodi sama sekali), dan setelah anak diimunisasi

3 kali ternyata tidak ada lagi anak yang tripel negatip. Dari 100

anak sebelum imunisasi ternyata hanya 12% anak yang mem-

punyai antibodi terhadap ketiga tipe virus polio, akan tetapi

setelah anak mendapat imunisasi 3 kali, persentase anak yang

mempunyai antibodi terhadap ketigatipe virus meningkat menjadi

95%. Demikian juga, status antibodi anak terhadap masing-

masing tipe virus polio meningkat setelah anak mendapat imuni-

sasi 3 kali.

Tabel 1. Status antibodi polio pada 100 anak umur 23 bulan sebelum dan

sesudah mendapat OPV buatan Rio Farma, di Yogyakarta, 1994

Neutralizing antibody polio positip

Tipe-1 Tipe-2 Tipe-3

Tipe-1+2+3

Trppel

negatip

Status

Imunisasi

n % n % n % n % n %

Sebelum

mendapat 29 29 19 19 34 34 12 12 54 54

OPV

Sesudah mendapat

OPV

III

Hasil uji netralisasi dan 54 anak yang seronegatip sebelum

mendapat imunisasi menunjukkan bahwa serocon version rate

masing-masing tipe virus polio dan ketiga tipe virus polio, se-

telah anak mendapat imunisasi, cukup baik yaitu tipe- 1 98%,

tipe-2 98%, tipe-3 94% dan tipe-1+2+3 93% (Tabel 2).

Tabel 2. Serokonversi 54 bayi umur 2-3 bulan yang mendapat OPV III

buatan Bio Farma, terhadap masing-masing tipe polio, di

Yogyakarta,

1994

Tipe-1

Tipe-2

Tipe-3

Tipe-1+2+3

Jumlah sero negatip

sebelum diberi OPV

54 54 54 54

Jumlah sero positip

sesudah diberi OPV III

53 53 51 50

Conversion rate

98,1% 98,1% 94,4% 92,6%

4) Pemeriksaan isolasi virus

Pemeriksaan isolasi virus dari 100 tinja anak sebelum imu-

nisasi, hanya menemukan satu isolat positip, dan setelah diiden-

tifikasi ternyata virus polio tipe-2.

Hasil isolasi dan 100 tinja anak sesudah mendapat imunisasi

juga hanya menemukan 2 isolatpositip, dan setelah diidentifikasi

ternyata adalah virus polio tipe-2 dan Coxsackie-B group. Virus

polio tipe-2 diekskresi oleh anak yang sama pada saat sebelum

dan sesudah ia mendapat imunisasi.

5) Pemeriksaan potensi vaksin

Hasil pemeriksaan potensi vaksin menggunakan sel HEp-2

sesuai dengan anjuran WHO, yang diambil pada saat sebelum

dan sesudah digunakan di lapangan, menunjukkan hasil potensi

yang masih memenuhi syarat, yang berarti tidak terjadi penurun-

an potensi selama penggunaan di lapangan (Tabel 3).

6) Pengamatan reaksi samping

Pengamatan setelah pemberian OPV 3 kali dan wawancara

terhadap orang tua bayi yang ikut dalam penelitian, selama 8 hari

dan masing-masing tahap vaksinasi, menunjukkan tidak adanya

Tabel 3. Hasil pemeriksaan potensi vaksin polio oral Bio Farma, Batch

No. 270063

Tgl. Pengambilan

sampel di

lapangan

TgI. Pengiriman

sampel ke

Laboratorium

Tgl. Pemeriksaan

sampel

Titer

Trivalent

OPV

I I Januari 1994

12 Januari 1994

13 Januari 1994

25 Januari 1994

I I Februari 1994

12 Februari 1994

13 Februari 1994

25 Februari 1994

I Maret 1994

12 Maret 1994

13 Maret 1994

25 Maret 1994

25 Januari 1994

26 Februari 1994

25 April 1994

3 Februari 1994

4 Maret 1994

2 April 1994

6.4

/ml

6.4

/ml

6.4

/ml

6.4

/ml

6.4

/ml

6.4

/ml

6.4

/ml

6.4

/ml

6.4

/ml

6.4

/ml

6.4

/ml

6.4

/ml

gejala-gejala reaksi samping setelah pemberian vaksin oral polio

pada bayi-bayi kelompok studi, baik setelah pemberian yang

pertama, ke dua maupun yang ke tiga. Demikian juga dengan

pengukuran suhu badan anak, ternyata tidak ada kenaikan tem-

peratur badan di atas normal ataupun penurunan di bawah normal

(Tabel 4).

Tabel 4. Pengamatan reaksi samping pada penelitian vaksin polio oral

buatan

Bio

Farma,

Yogyakarta,

1994

Gejala yang diamati Ya (%) Tidak (%) 36,9°C

37°C

37,1°C

Suhu badan

Panas

Batuk

Tenggorokan merah

Pilek

Muntah

Mencret

Kaku kuduk

Lumpuh satu kaki

Lumpuh dua kaki

100

PEMBAHASAN

Dari pemeriksaan serum anak sebelum dan sesudah vaksi-

nasi dengan vaksin polio oral buatan Bio Farma, ternyata hasil

serokonversi terhadap masing-masing tipe dan ketiga tipe virus

polio sangat baik. Bila hasil uji coba ini dibandingkan dengan

hasil-hasil penelitian yang pernah dilakukan di Lampung

(2)

dan

Bandung

(3)

yang menggunakan vaksin sejenis buatan SK&F

Smith Kline atau Pasteur Merieux yang biasa dipakai dalam

program imunisasi, ternyata tidak berbeda (Gambar 1).

Demikian juga bila dibandingkan dengan hasil-hasil pene-

litian di beberapa negara di Asia (Tabel 5), maka hasil sero-

konversi penelitian ini lebih baik dari hasil penelitian di Oman,

Pakistan, Saudi Arabia dan Uganda. Sedangkan dengan hasil

penelitian di Cina, Korea, Zimbabwe dan Singapura hampir

sama meskipun lebih rendah sedikit. Dari hasil-hasil penelitian

tersebut di atas juga terlihat bahwa serokonversinya terhadap

tipe-2 lebih tinggi bila dibandingkan dengan tipe-1 dan 3. Me-

nurut beberapa ahli, hal ini mungkin disebabkan oleh adanya

interferensi dan tipe-2 dan virus entero lain terhadap tipe-1 dan

tipe-3

(6)

Cermin Dunia Kedokteran No. 117, 1997

Gambar 1. Seroconversion rate terhadap OPV III dan anak-anak di

Bandung

(1979)

dan

Lampung

(1984)

Gambar 2. Status antibodi polio anak setelah mendapat imunisasi lengkap

di Jakarta (1989) dan Palembang (1991)

vaksin oral polio buatan Bio Farma cukup tinggi dibandingkan

dengan status antibodi anak setelah mendapat imunisasi rutin

dan program (SK&F Smith Kline atau Pasteur Merieux).

Tabel 5. Serokonversi terhadap OPV setelah pemberian 34 kali dosis

pada anak-anak umur 27 tahun di beberapa negara Asia*)

Hasil isolasi virus polio tipe-2 dan satu anak sebelum diberi

vaksin tidak mempengaruhi pembentukan antibodi anak setelah

mendapat vaksinasi.

Neutralizing antibody (%)

Negara

Tipe-1 Tipe-2 Tipe-3

Jadual

Imunisasi

(bulan)

Jumlah

bayi

Enceran

serum

Cina

Korea

Oman

Pakistan

S. Arabia

Singapura

Uganda

Zimbabwe

100

2/3/4

2/4/6

3/5/7

0/3/5/7

3/4/5

1 : 8

Berdasarkan hasil penelitian ini maka vaksin polio oral

buatan Bio Farma memenuhi syarat untuk dipergunakan dalam

program imunisasi, khususnya dalam rangka program eradikasi

polio di Indonesia.

UCAPAN TERIMA KASIH

Penulis mengucapkan banyak terima kasih kepada yang terhormat

Direktur Umum Perum Bio Farma dan Direktur Pengembangan Perum Bio

Farma, atas kepercayaan yang diberikan kepada Pusat Penelitian Penyakit

Menular untuk melakukan penelitian ini.

*) Dikutip dan WHO

(6)

Status antibodi anak setelah mendapat imunisasi dengan

vaksin Bio Farma, terhadap tipe-1+2+3 lebih tinggi dibandingkan

dengan status antibodi anak setelah mendapat imunisasi dengan

vaksin yang digunakan dalam program imunisasi (SK&F) di

Jakta dan Palembang (Gambar 2).

Demikian juga penulis mengucapkan banyak terima kasih kepada Kepala

Pusat Penelitian Penyakit Menular yang telah memberikan saran dan

petunjuknya dalam pelaksanaan penelitian ini kepada penulis.

Ucapan terima kasih juga ditujukan kepada:

1 . Kepala Kan. Wil. Departemen Kesehatan Propinsi DI Yogyakarta,

2. Kepala Dinas Kesehatan Propinsi DI Yogyakarta,

3. Kepala Dinas Kesehatan Kodya Yogyakarta,

Isolasi virus polio dan anak sebelum divaksinasi, ternyata

hanya menemukan satu anak yang mengekskresi virus polio pada

saat sebelum dan sesudah imunisasi, tetapi tidak mengganggu

pembentukan antibodi anak setelah mendapat vaksinasi. De-

mikian juga ditemukan ekskresi virus Coxsackie-B group dari

anak yang sudah mendapat imunisasi, tetapi tidak mengganggu

pembentukan antibodinya. Mungkin infeksi virus Coxsackie-B

tersebut terjadi sesudah imunisasi, sehingga tidak menghambat

pembentukan antibodi terhadap vaksin polio yang diberikan.

4. Kepala Puskesmas Kec. Wirobrajan, Mantrijeron, Tegalrejo dan Mergangsan.

5. Kepala RSU Kodya Yogyakarta,

6. Semua pihak yang terlibat dalam penelitian ini,

atas segala bantuan yang berupa pemberian izin penelitian, penyediaan tempat

dan fasilitas lainnya, serta bantuan dalam pengambilan spesimen, sehingga

penelitian ini dapat berjalan dengan lancar.

KEPUSTAKAAN

1. WHO. Manual for the Virological Investigation of Poliomyelitis. Global

Poliomyelitis Eradication By the Year 2000. EPIJPoIio/90. 1: 6371.

Seperti halnya dengan vaksin yang selama ini dipergunakan

dalam program imunisasi di Indonesia, dan strain Sabin,maka

ternyata tidak dijumpai adanya reaksi samping yang memba-

hayakan bagi kesehatan anak penerima vaksin.

2. Gendrowahyuhono dkk. Tanggap kebal anakterhadap vaksinasi polio

dengan dua kali dosis dan tiga kali dosis. Medika 1987; 4: 36988.

3. DepKes RI. Hasil trial imunisasi polio di lima kecamatan di Kodya Bandung

(survei sero-virologik) pada bayi sehat golongan umur 314 bulan, pada

tahun 19781979. Suatu kerjasama antara Dit. Jen. P3M. Dinas Kesehatan

Prop. Jawa Barat dan PN Bio Farma, 1981.

4. Gendrowahyuhono. Serokonversi terhadap vaksin polio oral di kalangan

anak-anak di daerah kumuk di Jakarta. Cermin Dunia Kedokt 1993; 83:

4951.

KESIMPULAN DAN SARAN

Dari hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa vaksin

polio oral buatan Bio Farma, yang diberikan pada bayi-bayi yang

berumur 23 bulan, tidak menimbulkan reaksi samping.

5. Bambang Heryanto, Gendrowahyuhono. Tanggap kebal terhadap vaksin

oral pada anak-anak di daerah kumuh di Palembang. Maj Kes Mas Indon

1994; XXII (10): 63542.

Hasil serokonversinya terhadap masing-masing tipe dan

ketiga tipe virus polio, sangat baik.

6. Robertson SE. Poliomyelitis. The Immunological Ba for Immunication.

Expanded Programme on Immunization, World Health Organization, Geneva,

1993.

Status antibodi anak setelah mendapat imunisasi dengan

Cermin Dunia Kedokteran No. 117, 1997 55