/srv/www/portalkalbe/files/cdk/files/13_RodaminBdanMetanilKuning.pdf/13

Rodamin

dan Metanil Kuning

("Metanil

Yellow")

Sebagai Penyebab Toksik

Pada Mencit dan Tikus Percobaan

Nainggolan Sihombing

Unit Penelitian Gizi Diponegoro

Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Dep Kes R.I., Jakarta

PENDAHULUAN

Dalam penyelidikan pada tahun 1978, ditemukan bahwa ro-

damin B dan metanil kuning dipakai sebagai pewarna makanan

di Jakarta.

Kedua bahan pewarna ini sebenarnya diproduksi

untuk mewarnai kertas, tekstil, kayu dan barang industri non

pangan lainnya.

Laporan tentang adanya kasus keracunan ma-

kanan yang mengandung rodamin B atau metanil kuning belum

diperoleh di kepustakaan Jakarta. Berhubung kedua bahan

pewarna ini telah terbukti sering dan banyak digunakan peda-

gang kecil di Jakarta untuk mewarnai makanan kecil dan mi-

numan, maka telah dilakukan percobaan biologik pada mencit

dan tikus putih. Data yang diperoleh kiranya dapat dipergu-

nakan oleh para ilmuwan untuk ditafsirkan pada manusia.

Diharapkan lambat laun masyarakat Indonesia dapat menge-

tahui bahwa rodamin B dan metanil kuning memang berbahaya

bagi kesehatan manusia dan menolak penggunaannya dalam

makanan.

BAHAN DAN METODE

1. Zat pewarna

Rodamin

B diperoleh dari PT Krikras Jakarta asal produk

pabrik Ciech Organik B

Div Warsawa. (1 gram produk ekiva-

len dengan 210 mg rodamin B murni). Metanil kuning berasal

dari pabrik Imperial Chemical Industry Ltd London, PT Galic

Bina Mada Jakarta. (1 gram ekivalen dengan 435 mg metanil

kuning)

2. Makanan stok

Makanan stok diperoleh dari Unit Gizi Diponegoro Badan

Litbangkes Dep Kes Jakarta (Addendum 1).

Makanan yang dicampur dengan rodamin B (untuk perco-

baan I dan II) : 1 gram bahan pewarna rodamin B dicampur

dengan 3 kg makanan stok. Kadar rodamin B dalam makanan

) Ringkasan naskah Ceramah Ilmiah di PT Kalbe Farma, Jakarta tanggal

22 Februari 1983.

50 Cermin Dunia Kedokteran No. 34, 1984

ini adalah 7 mg per 100 gram.

Makanan yang dicampur dengan metanil kuning (untuk per-

cobaan I) : 1 gram bahan pewarna metanil kuning dicampur

dengan 3kg makanan stok. Kadar metanil kuning dalam ma-

kanan ini adalah 14,5 mg per 100 gram.

3. Hewan Percobaan

Mencit dan tikus putih sapihan diperoleh da

ri Unit Gizi

Diponegoro, Badan Litbangkes, Dep Kes, Jakarta.

4. Perlakuan hewan percobaan

Percobaan I

Delapan belas ekor mencit dibagi menjadi 3 grup, yang ma-

sing-masing terdiri dari 6 ekor. Grup I diberi makan stok yang

dicampur dengan rodamin B. Grup II diberi makanan stok yang

dicampur dengan matanil kuning. Grup III diberi makanan stok

saja dan dipakai sebagai grup kontrol. Semua hewan diberi

makan dan minum ad libitum selama 16 minggu (Tabel 1).

Percobaan II

Grup A (percobaan) dimulai dari seekor tikus jantan dan 2

ekor tikus betina yang berumur 3 bulan untuk dikawinkan se-

lama 3 hari. Kemudian ke dua ekor tikus betina itu dipisahkan

selama masa hamil sampai dekat pada hari melahirkan. Setelah

beranak, anak-ananya dibiarkan tetap bersama induknya sampai

umur 3 bulan. Pada umur ini dipilih secara acak 6 ekor anak

jantan dan 6 ekor anak betina untuk dipergunakan sebagai 6

pasang parent stok (FI). Sisa anak yang tidak terpakai dibuang

dan

6 parent

stok (keturunan grup A) ini kemudian

dikawinkan.

Dari hasil perkawinan dipilih lagi secara

acak 6 ekor anak jantan dan 6 ekor betina yang kemudian di-

pasangkan untuk dikawinkan (F2). Demikianlah seterusnya di-

lakukan sampai dengan generasi ke-6 (F6) (tabel 2). Semua ti-

kus mulai dari FI sampai F6 dari keturunan grup A ini diberi

makanan campuran dengan rodamin B selama 12 bulan.

Grup

B (kontrol) juga dimulai dari seekor tikus jantan yang

Cermin Dunia Kedokteran No. 34, 1984 51

ADDENDUM

dikawinkan dengan 2 ekor tikus betina berumur 3 bulan. Perlakuan

selanjutnya sama seperti pada grup A, untuk memperoleh 6 generasi (

F1 - F6). Kemudian pasangan F1 dari grup B (kontrol) merupakan

counter

part

dari F1 grup A (percobaan). Demikian seterusnya

pasangan-pasangan F2 sampai dengan F6. Grup B menjadi

counter

part

masing-masing dari pasangan F2 sampai dengan F6 grup A (

percobaan). Semua tikus dari semua generasi grup B hanya diberi

makanan stok selama 12 bulan dan dipergunakan sebagai grup kontrol.

HASIL

· Percobaan I

Mencit yang diberi makanan yang dicampur

dengan rodamin B dan metanil kuning selama 16

minggu. Pada grup rodamin G gejala menyolok

adalah bulu-bulu menjadi kasar dan pertumbuhan

badan terlambat kalau dibandingkan dengan

kelompok kontrol. Mata dan air seninya

berfluoresensi bila kena sinar matahari. Hewan-

hewan nampak aktif sadar. Pada minggu ke-7

mereka umumnya gelisah, sering menggaruk-garuk

badannya sehingga mendapat luka-luka dibe-

berapa tempat bagian tubuhnya (Gambar 1). Pada

minggu ke-8 keaktifan mereka mulai berkurang dan

geraknya lambat dan malas. Pada minggu ke-10

ditemukan seekor mencit mati (Tabel 1).

Pada kelompok mencit yang diberi meta-nil

kuning, pertumbuhan badan juga terlambat (lihat

Grafik), tetapi mereka aktif dan sadar. Di antara 6

ekor mencit ditemukan 2 ekor yang menderita

megalosefali (Gambar 2), dan 2 ekor lainnya

mendapat pembengkakkan pada ke dua kaki

depannya. Seperti halnya kelompok rodamin B,

pok metanil kuning pun mulai bergerak lam-ban

pada minggu ke-8 dan ke-9 masing-masing

ditemukan seekor mencit mati (Tabel 1).

Pada otopsi dari ke tiga ekor mencit yang mati (

1 ekor dari grup rodamin B dan 2 ekor dari grup

metanil kuning), hanya menunjukkan keadaan gizi

yang jelek dimana semua deposito lemak di dalam

tubuhnya habis sama sekali.

Sisa mencit grup 1 yang berjumlah 5 ekor

dibunuh pada akhir minggu ke-16. Pada hati seekor

mencit ditemukan 1 bungkul tumor hapatoma

dengan ukuran ± 0,5 x 0,5x 0,25 cm yang terletak

pada lobus hepatis dekstra.

Sisa mencit yang berjumlah 4 ekor dari grup II

dibunuh pada akhir minggu ke-16 juga. Dua ekor

diantaranya mengalami perubahan ginjal (ginjal

kistik). Terlihat jelas bahwa bagian pielum meluas

dan bagian korteks menipis.

Percobaan II

Enam pasang tikus selama 6 generasi diberi makanan yang

dicampur dengan rodamin B (Tabel2).

Gejala klinik yang nyata adalah perubahan warna yang menjadi

kemerah-merahan pada kulit dan ekor (mungkin kena sentuhan

makanan berwarna setiap hari atau mungkin konsentrasi rodamin B di

dalam darahnya lebih tinggi dari biasanya). Bola mata, air mata, dan air

seni mereka juga kemerahan-merahan, air seninya berfluoresensi kalau

kena sinar ma-

"COMPOSITION OF PREPARED STOCKDIETS FOR ALBINO - RATS, STRAIN L.M.R."

Basic

Foodstuff

Protein

Fat

Weight

in kg

Weight

in%

1. Rice

2. Soybean, boiled, dried

3. Peanut, chelled, fried

4. Skim milk powder, high quality

5. Coconut-oil

6. Kitchensalt

7. Bonemeal

8. Vit. B-complex tablet *

9. Vit. A + D

in starch **

10. Ferri - citrate

7.0

100

10.0

4.5

1.5

2.0

250 ml

0.15

0.075

30 tab.

54.3

24.4

8.1

10.8

1.3

0.8

0.4

±18.4 kg

±100%

Average Composition

as calculated

Crude Protein

19.6

Total Fat

Total Energy

370 Cals.

NPU-standard

NPU-operative

as analysed

Crude Protein

20.3

For Comparison

Composition of Purina Laboratory Chow :

(Ralston Purina Co St Louis, USA).

Crude Protein

23.0

Nitrogen free extract

50.6

Crude fat

5.8

Crude fibre

4.9

Ash

7.7 %

* B-complex,

** Rovimix A + D

Type 500/100 Roche :

Each table contains :

1 gram contains 500.000 IU Vit. A +

Thiamin HO

3 mg

100.000 IU Vit. D

Riboflavin

2 mg

grams Rovimix to 400 grains of starch

Pyridoxin HCl

0.5 mg

For 18.4 kg of food use 8 grams of

Calcium pantothe-

(Starch

+ Rovimix).

nate

2 mg

(equiv.

to 0.25 g Rovimix).

Nicotinamide

umber Unit Gizi Diponegoro - Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan, De-

partemen Kesehatan.

Kompleks Nutrition Centre, Seameo Tropmed - U.I.

Salemba 4 (Kampus U.l.) Jakarta.

October 1978

Tabel

Percobaan II :

Disain percobaan dengan mencit, jumlah kematian dan jenis kelainan patologi pada mencit yang

diberi makanan yang dicampur rodamin B dan metanil kuning.*

Grup

Jenis

Makanan

Jumlah

Mencit

pada

permulaan

Jumlah kematian

Mencit pada

minggu ke

Jumlah

Total

Kelainan Patologi

Keterangan

VIII

Hati

Ginjal

Rodamin B

1**

Hepatoma

(1 ekor)

Metanil

kuning

2**

Ginjal kistik

(2 ekor)

III

Kontrol

Lama percobaan 16 minggu

Kandungan bahan pewarna rodamin B (tidak murni) adalah 1 gram (ekivalen dengan 7 mg) per 100 gram

stokdiet.

Kandungan bahan pewarna metanil kuning (tidak murni) adalah 1 gram (ekivalen dengan 14.5 mg) per 100

gram stokdiet.

** Kelainan patologi ditemukan pada mencit yang dibunuh pada akhir minggu.

Grafik : Perobahan berat badan mencit yang diberi masing masing

dari

rodamin B dan metanil kuning dalam diet selama 16 minggu (

persen

dari berat badan semula).

Kontrol

Metanil

kuning

Rodamin B

Diet

pemberian

-- 1 gram

per 3

-- 1 gram

mg)

malcan

rodamin B

(

ekuiv.

kg stokdiet

metanil kuning

per 3 kg stokdiet

dan minum ad.

210 mg)

(ekuiv. 435

libitum

Gambar 1 : Mencit yang mendapat benjolan dan luka pada kaki kanan,

karena pemberian rodamin B dalam diet pada percobaan

selama 16 minggu.

200

150

100

Bulan

52 Cermin Dunia Kedokteran No. 34, 1984

Gambar 2 : Mencit yang memperoleh metanil kuning dalam diet selama 16

minggu, menderita megalosefali pada minggu ke 10.

Cermin Dunia Kedokteran No. 34, 1984 53

Tabel 2

Percobaan II : Jumlah tikus-tikus

yang

mati dan yang mendapat tumor pada pengamatan selama 6 minggu dengan pemberian makan-

yang

mengandung 7 mg Rodamin B murni dalam 100 gram diet selama 12 bulan, setiap generasi (F) terdiri

dari 6 pa-

sang hewan.

Jumlah kematian dan Jumlah Tumor yang

Jumlah

Generasi

Jumlah

ditemukan pada bulan ke --

Jumlah

tikus

masmg

Total

Kem

tal

Keterangan

(F)

mas

III

VII

VIII

XII

F- 1

Ditemukan

limfoma

F- i

pada 1 ekor

tikus

F-2

F-3

F-4

F-5

F-6

Catatan ; -- Pada kelompok kontrol tidak ada yang mati

Pada kelompok kontrol tidak ada pertumbuhan tumor

tahari. Tubuhnya rata-rata lebih kecil bila dibandingkan de-

ngan hewan kontrol (Gambar 3), akan tetapi semua hewan

menjadi aktif, malah banyak yang galak, agresif dan kanibal.

Tikus-tikus umumnya mengalami diare sebelum mati, dan yang

mati kemudian dimakan oleh tikus-tikus yang masih hidup dan

aktif. Mulai bulan ke-10 banyak tikus mengalami kerusakan

tubuh (Gambar 4).

Angka kematian pada generasi pertama cukup tinggi, akan

Gambar 3 : Perbedaan besar tubuh tikus yang diberi rodamin

dalam diet

dengan kontrol pada penelitian selama 12 bulan.

Gambar 4 Tikus yang mengalami kerusakan tubuh pad

a pemberian

rodamin

dalam diet pad

a penelitian selama 12 bulan.

tetapi makin lama pada generasi berikutriya menjadi makin

berkurang (Tabel 2).

Pada otopsi, ditemukan tumor limfoma masing-.masing 1

ekor pada Fl, F2, F3, F4, F5 dan F6 (Tabel 2). Waktu yang

diperlukan untuk menimbulkan tumor limfoma antara 6 sampai

9 bulan. Limfoma yang sering ditemukan berada pada me-

diastinum dan kadang-kadang pada mesenterium. Besarnya

bervariasi

dari

yang berdiameter

0,25 cm sampai 2,5 cm.

Tikus-tikus

dari

grup kontrol tidak ada yang mati dan pada

otopsi tidak ditemukan tumbuh ganda di dalam tubuhnya.

Gambar 5 Beginilah label dari kemasan plastik yang berisi bahan pe-

warna "makanan", dijual di pasaran bebas Jakarta. Per-

hatikan "Special Colours fo all Purposes".

Gambar 6 :

Bahan pewarna dalam kemasan kaleng, botol, kantong plastik

dijual di pasaran bebas Jakarta sebagai pewarna makanan.

PEMBAHASAN

Data mengenai efek toksik yang diperoleh

dari

percobaan

bahan pewarna rodamin B dan metanil kuning pada mencit dan

tikus percobaan menimbulkan pertanyaan, apakah keracunan

serupa seperti yang terlihat pada hewan percobaan itu, akan

terjadi juga pada manusia yang sering makan makanan yang

mengandung pewarna rodamin B atau metanil kuning.

Mungkin ada gunanya juga kalau diutarakan di sini, bahwa

pada pembuatan bahan pewarna seperti pembuatan bahan

-bahan

kimia organik pada umumnya dibutuhkan proses yang rumit

untuk memperoleh produk yang murni. Ada kalanya

Cermin Dunia Kedokteran No. 34, 1984

terbentuk pula produk sampingan yang tidak dikenal sifatnya. Ini

mungkin berbahaya atau tidak berbahaya, tetapi kehadiran zat itu

tidak diinginkan.

Rodamin B dibuat

dari

meta

dietilaminofenol dan ftalik

anhidrid, kemudian diasamkan dengan asam hidroklorid. Kedua

bahan baku ini bukanlah bahan yang boleh dimakan. Se-

lanjutnya asam HC1 yang dipakai tentunya bertingkat "teknis"

dengan kadar logam logam berat yang cukup tinggi. Begitu juga

metanil kuning yang dibuat

dari

asam metanilat dan dife-

nilamin. Kedua bahan ini toksik. Jadi, dapat kita bayangkan

bahwa di dalam bahan pewarna baik rodamin B maupun meta-

nil kuning, berbagai bahan lain masih ada di dalamnya. Mereka

turut ambil bagian sebagai penyebab toksik tambahan pada

hewan percobaan. Memang kemurnian pewarna rodamin B dan

metanil kuning diusahakan tinggi oleh pabrik pembuatnya, tetapi

karena bahan pewarna ini dimaksudkan untuk mewarnai

sebangsa tekstil, kertas, kayu dan sebagainya, maka kehadiran

logam berat serta produk sampingan lainnya yang dianggap

rendah bagi industri non-pangan sudah cukup tinggi untuk

pewarna makanan.

Kontaminasi dapat pula terjadi

dari

kemasan bahan pewarna

non pangan yang kurang baik mutunya sehingga menambah

bahaya kesehatan manusia bila menggunakan bahan pewarna ini

untuk makanan.

KESIMPULAN

Pemberian rodamin B dan metanil kuning dalam diet mencit

dan tikus percobaan mengakibatkan efek toksik pada hewan

tersebut. Ini menegaskan keterangan yang ada dalam ke-

pustakaan, yaitu baik rodamin B maupun metanil kuning adalah

bahan pewarna untuk mewarnai barang

barang non pangan

, jadi

tidak dapat ditolerir untuk mewarnai makanan manusia.

Karena masyarakat Indonesia di Jakarta khususnya dan di

Indonesia umumnya memang senang pada makanan yang ber-

warna, maka pengadaan bahan pewarna makanan yang diizin-

kan dengan derajat

Food Grade

dan memenuhi persyaratan

higine, harus mendapat perhatian instansi pemerintah yang

berwenang c.q. Departemen Kesehatan, Departemen Perda-

gangan dan Departemen Perindustrian. Pengadaan ini hendak-

nya disertai dengan harga yang kompetitif dengan harga pewar-

na non pangan yang sebelumnya diperdagangkan sebagai pe-

warna pangan, sehingga dapat dijangkau masyarakat luas seperti

sediakala.

RINGKASAN

Dua pewarna non-pangan dikenal dengan nama rodamin B

yang memberi efek warna merah jambu, dan metanil kuning

yang memberi warna kuning telor digunakan luas sebagai pe-

warna makanan di Jakarta.

Sebagai bahan non-pangan pada umumnya bila berada di

dalam makanan kemudian dikonsumsi manusia, dapat dira-

malkan akan mengganggu kesehatan dalam jangka waktu pen-

dek atau panjang. Untuk pembuktiannya telah dilakukan per-

cobaan pada mencit dan tikus putih dengan mencampurkan

masing

dari

kedua bahan pewarna non-pangan tersebut

Cermin Dunia Kedokteran

No. 34, 1984 55

ke dalam diet mereka sehari-hari.

Hasil penelitian menguatkan dugaan, bahwa kedua bahan

pewarna non-pangan ini dapat mengganggu kesehatan hewan

percobaan.

Ucapan terima kasih :

Kepada Dr. Iwan T. Budiarso, ahli patologi veteriner pada Puslitbang

Kanker, Badan Litbangkes, Dep Kes R.I., yang telah memberi penilaian

simtom patologi

dari

penelitian biologik in

KEPUSTAKAAN

Sihombing G. An Exploratory Study on Three Synthetic Colour-

ing Matters Commonly Used As Food Colours In

Jakarta (Thesis),

1978; p. 37 - 82.

Fairhall LT. Industrial Toxicology, 2nd. Ed., New York: Hafner

Publishing Company, 1975 ; p. 235 - 236.

3. Unit Penelitian Gizi Diponegoro, Badan

Litbangkes Depkes R.I.

Miller DS. Worksheet for Determination of Net Protein Utilisation

using Rats Body N Technique, 1978; p 2.

Jacobs MB. The Chemical Analysis of Foods and Food Products, 3rd.

Ed, New York : Robert E. Krieger

Publishing Co., Inc. Hung-

tington, 1973; 11743, p. 103 - 105.

Imperial Chemical Industries. Edicol Colours for Foodstuffs, Pat-

tern leaflet 113.

Kalender Kegiatan

Ilmia

SECOND INTERNATIONAL CONGRESS on TRADITIONAL ASIAN

MEDICINE

Dates : September 2, through September 7, 1984

I. Scientific programe :

Theme of the congress :

Traditional medicine in Asian countries and their place in

pluralistic health care systems.

Main subject areas of the congress :

1. The sources and histories of classical traditions

2. Popular medicine

3. Ethnobotany, ethnopharmacology, and allied subjects

4. Models of integration : problems and chances

5. The social construction of illness experience

6. Clinical and experimental studies of therapeutic practices

7. Primary health care and education of health care workers.

II. Social programme :

Ladies' Programme : traditional Indonesian beauty treatment with traditional drug

and traditional cosmetic.

III. Cultural evening.

Place

: Bumi Hyatt Hotel, Jln. Basuki Rachmat 124 - 128.

Phone 031 - 470875, Surabaya

Secretariat

: Faculty of Pharmacy, Airlangga University

J1n. Dharmahusada 47, Surabaya

Phone (031). 43710

Registration fee: For Indonesian participant is

: Rp. 50.000,

and the accompanying person

: Rp. 25.000,-

Sent payment to : ICTAM II, Bank Account : BNI 46

branch No. 11.02.090.8000 UNAIR