Cermin Dunia Kedokteran

TEKNIK

Beberapa Metoda Penetapan

Kadar Hemoglobin Darah

Sihadi, Suryana Pura sastra

Pusat Penelitian dan Pengemba an Gizi, Bog

ah gizi yang dihadapi

i pada ibu hamil 63,6%, dan pada anak

mi gizi terendah terdapat di Provinsi Sulawesi

Utar

ngan prestasi belajar

ada anak sekolah di Bogor dan sekitarnya menghasilkan data

nyai kesulitan dalam berpikir

tera

menurun

kem

ut kadar hemoglobin (Hb).

Apa

sebagian kecil; sebenarnya masih banyak hasil penelitian yang

mengungkap akibat negatip lain bila seseorang menderita anemi.

n cara menentukan kadar hemoglo-

bin (Hb) dalam dara

mi dengan

kan

par

b telah di

um pada be

untuk enetapkan pr

emi. Apabila kadar Hb

berada di bawah bata

ng ditetapkan, maka ia

erita

anem izi.

Batasan nilai kadar Hb untuk menentukan seseorang men-

amil. Karena itu WHO (1972) telah menetapkan batasan nilai

ianjurkan untuk digunakan sebagai standar

KERTAS LAKMUS

Metoda ini sangat

tis tidak memerlukan

ereaksi ataupun peralatan tertentu, karena yang dipergunakan

hingga darah menjadi kering (sekitar 5 menit). Setelah kering,

warna darah yang terbentuk dibandingkan secara visual di tem-

Salah satu di antara beberapa masal

Untuk mengetahui apakah seseorang menderita anemi, yang

paling tepat biasanya denga

oleh negara-negara berkembang termasuk Indonesia, adalah

anemi gizi. Secara umum prevalensi anemi pada ibu hamil dan

anak balita di Indonesia masih tinggi. Angka rata-rata nasional

prevalensi anemi gizi bes

(5)

. Penentuan ane

ara um

mengguna

rbag

am er H

gunakan sec

ai survei

evalensi a

darahny

san nilai ya

mend

i g

balita 55,1%. Angka prevalensi gizi pada ibu hamil terendah

terdapat di Provinsi Sulawesi Tengah sebesar 45,5%, sedangkan

tertinggi di Sumatera Utara sebesar 77,9%. Untuk anak balita

prevalensi ane

derita anemi atau tidak, bagi orang dewasa adalah berbeda

dengan anak-anak, dan juga berbeda bagi wanita hamil dan tidak

a sebear 24,2%, sedangkan yang tertinggi di Provinsi Su-

lawesi Tenggara sebesar 8l,4%

(1)

Penelitian tentang hubungan anemi de

kadar Hb yang d

internasional, yaitu seperti berikut

(6)

Anak prasekolah 11 g %

Anak sekolah 12 g

bahwa anak yang anemi mempu

ng dan berpikir secara analog. Anak yang anemi

ampuan berkonsentrasi dalam menyelesaikan coding test,

lebih mudah terganggu konsentrasinya oleh musik disco. Hasil

penelitianjuga menunjukkan bahwa hasil ujian Ebtanas kelom-

pok anak yang anemi lebih rendah (p <0,05) dibandingkan hasil

anak yang tidak anemi

(2)

Hasil penelitian Karyadi (1974) di daerah perkebunan karet,

Sukabumi, menunjukkan bahwa penyadap karet yang anemi

mendapatkan lateks hasil sadapan lebih sedikit daripada yang

tidak anemi. Penyadap yang anemi mendapat lateks 18,7% lebih

rendah daripada yang tidak anemi

Penelitian lain yang dilakukan terhadap para pemotong tebu

di sebuah perkebunan tebu di Guatemala, menunjukkan bahwa

kemampuan kerja fisik yang dinyatakan dalam skor naik-turun

bangku Harvard bervariasi menur

Laki-laki dewasa 13 g %

Wanita dewasa 12 g %

Wanitahamilil g%

Metoda untuk menentukan Hb saat ini banyak macamnya,

masing-masing mempunyai kelebihan dan kelemahannya. Pe-

milihan metoda yang tepat tergantung pada keadaan serta fasili-

tas yang tersedia. Tulisan ini menyajikan secara ringkas cara

kerja masing-masing metoda dengan kelemahan dan kelebihan-

nya.

) METODA

sederhana, prak

adalah kertas yang disebut kertas lakmus, khusus untuk menen-

an kadar Hb. C

tuk

aranya, setetes darah diteteskan di atas per-

mukaan kertas lakmus, didiamkan sebentar pada suhu ruang

bila kadar Hb rendah maka skor rendah, dan apabila kadar

Hb tinggi maka skor juga tinggi

(4)

. Gambaran di atas, barulah

Cermin Dunia Kedokteran No. 103, 1995

pat yang cukup terang dengan sederet warna standar yang di-

etan warna yang ada pada standar sudah dikalibrasi

kualitatif sehingga setiap warna me-

unjukkan nilai kadar Hb. Dengan demikian warna standar yang

ebanding dengan warna darah yang diuji menunjukkan kadar

darah

(7)

Metoda kerta

cocok untuk diper

peralatan atau. pereaksi

singkat. Tetapi hasil ya

mampuan tiap orang dalam membandingkan warna adalah tidak

sama sehingga hasil yang diperoleh akan berva

demikian variasi basil bisa diperkecil, a

kukannya telah mempunyai cukup pengalaman dalam meng-

unakan metoda ini, melakukannya secara berulang, cermat dan

liti.

) SIANMETHEMOGLOBIN

Berbeda dengan metoda kertas lakmus, metoda sianmethe-

oglobin ini memerlukan peralatan dan pereaksi khusus, tetapi

hasil yang diperoleh lebih teliti. Darah dipipet dengan meng-

unakan pipet mikro sebanyak 20 mikroliter, kemudian di-

larut

ilai dapat menghasilkan data

yang

OBIN TIDAK LANGSUNG

ambilan darah di lapang-

an d

yang memiliki fasilitas laboratorium yang diperlukan. Di labora-

torium, contoh darah yang mengering digunting, lalu direndam

dalam 5 ml larutan Drabkin hingga semua noda darah dari kertas

saring melarut. Waktu yang diperlukan untuk melarutkan contoh

darah kering ini biasanya selama 2 x 24 jam. Setelah semua

, perlakuan se-

pada metoda

sil yang diper-

aitu 1,14

(5)

aan kertas saring tadi

bisa bertahan hingga I bulan. Dengan demikian, pengiriman

empat jauh dapat dilakukan.

4) METODA SAHLI

Prinsipnya sama dengan metoda kertas lakmus, yaitu mem-

bandingkan warna secara visual, tetapi memerlukan peralatan

dan pereaksi tertentu. Berbeda dengan metoda sianmethemo-

globin, peralatan yang digunakan sangat sederhana, ringan,

sehingga memungkinkan dibawa ke lapangan, dan tidak ter-

gantung pada listnik ataupun baterai.

Kira-kira 5 tetes HCL 0,1 N dimasukkan ke dalam tabung

khusus yang disebut tabung hemometer. Darah yang akan di-

tent

ung bisa dilihat dan satu sisi yang sama. Kemudian

tabu

darah .

ianggap subjektif

(7)

karena pem-

n secara visual. Metoda ini bisa di-

hemoglobin tidak bisa dilakukan,

adar Hb hasil penentuan metoda

ktor 1,l

(5)

skan di atas permukaan gelas objek. Kemudian diaduk

engan batang saponin agar darah tidak membeku selama ± 45

ke dalam kuvet (tabung

khus

sediakan. Der

edemikian rupa secara

s lakmus ini bisa dilakukan oleh seti orang,

gunakan di lapangan karena tidak memerlukan

khusus, waktu yang çtiperlukan relatif

ng diperoleh bisa subjektif, karena ke-

contoh darah pada permukaan kertas melarut

Ianjutnya sama seperti yang telah diuraikan

sianmethemoglobin. Berdasarkan penelitian, ha

oleh masih harus dikalikan faktor koreksi y

Contoh darah kering di atas permuk

riasi. Walaupun

contoh darah dan t

pabila orang yang me-

kan dalam 5,0 ml larutan Drabkin (1 g NaHCO

, 0,05 g

KCN, 0,2 g KF(CN) dalam I liter aquades) yang sudah disedia-

kan sebelumnya di dalam suatu tabung reaksi. Larutan Drabkin

dikocok untuk menyempurnakan kelarutan darah sehingga di-

peroleh warna larutan yang homogen. Kepekatan warna larutan

dibaca menggunakan alat spektrophotometer padá panjang ge-

lombang 540 nm. Hasil pembacaan menunjukkan kadar Hb,

dihitung berdasarkan hasil pembacaan alat pada larutan standar

yang telah diketahui konsentrasinya

(7)

Metoda sianmethemoglobin ini sangat dianjurkan oleh WHO

(1968) karena sampai saat ini din

paling teliti. Kelemahannya adalah ketergantungan pada

alat spektrophotometer yang masih terbatas pada instansi ter-

tentu selain sukarnya pemeliharaan photometernya sendiri; alat

ini relatif sulit dibawa ke lapangan dan sangat tergantung pada

listrik. Di samping itu fasilitas lain yang diperlukan dalam

penyiapan larutan Drabkin, listrik dengan voltase yang stabil,

biasanya sulit tersedia di lapangan.

3) SIANMETHEMOGL

Metoda ini merupakan pengembangan metode sianmethe-

mog1obin

(5)

sebagai usaha untuk mengatasi kelemahannya. Pe-

netapan kadar Hb dengan metoda ini di lapangan sangat praktis,

karena darah yang akan diperiksa di laboratorium tidak dalam

bentuk cair. Apabila pelaksanaan peng

alam waktu yang relatif lama, sampel darah yang telah di-

teteskan dalam kertas dapat dimasukkan ke dalam amplop dan

dikirim ke laboratorium yang dimaksud lewat pos.

Darah dipipet dengan menggunakan pipet mikro sebanyak

20 mikroliter, kemudian seluruhnya diteteskan secara bertahap

dan perlahan ke atas permukaan kertas saring sehingga mem-

bentuk suatu spot darah, selanjutnya dibiarkan mengering pada

suhu ruang. Spot darah kering ini kemudian dibawa ke instansi

ukan kadar Hb-nya dipipet sebanyak 20 mikroliter, dan

dimasukkan ke dalam tabung hemometer tadi. Tabung kemudian

ditempatkan dalam alat hemometer. Pada alat tersebut terdapat

dua tempat tabung. Tabung pertama berisikan contoh darah yang

akan ditentukan kadar Hb-nya, dan tabung ke dua berisikan

Jarutan standar. Posisi kedua tabung adalah berdampingan, dan

isi kedua tab

ng yang benisikan contoh darah ditambah aquades secara

penlahan hingga warna larutan menyamai warna larutan standar

yang ada pada tabung di sebelahnya. Setelah persamaan warna

tercapai, kadar Ub dapat diketahui dengan membaca batas per-

mukaan larutan yang berimpit dengan skala yang tertera pada alat

hemometer dekat tempat tabung contoh

(8)

Metoda Sahli ini masih d

bandingan warna dilakuka

anjurkan bila metoda Sianmet

dan berdasarkan penelitian, k

Sahli perlu dikalikan fa

5) METODA ARTEL HEMOGLOBINOMETER

Metoda penentuan Hb darah ini memerlukan peralatan khusus

yang disebut Artel Hemoglobinometer.

Sebanyak 2 tetes darah berasal dari jan tangan langsung

ditete

menit. Darah kemudian dipindahkan

us bertutup). Pemindahan darah ini harus dilakukan sécara

cermat sehingga tidak timbul gelembung udara, karena bisa

mengganggu pembacaan dan terjadi penyimpangan hasil. Kuvet

kemudian dimasukkan ke dalam alat Artel Hemoglobinmeter.

Alat dinyalakan dengan cara menekan tombol "ON" dan se-

Ianjutnya segera timbul smgnal pada layar baca alat. Kemudian

tekan tombol "read", selanjutnya pada Iayar akan menampilkan

Cermin Dunia Kedokteran No. 103, 1995 33

tanda rd. Kemudian tanda rd berubah menjadi angka yang me-

nunjukkan kadar Hb dalam g/dl

(9)

Alat ini masih dalam taraf uji coba, sehingga saat ini belum

digunakan di tingkat masyarakat.

6) METODA COMBUR

yang berisikan pereaksi standar, kemudian dikocok hingga

omogen. Tabung kemudian dimasukkan ke dalam alat Ames

lat akan tampil angka yang

men

apasitas volume sebesar

10 m

ilih me-

toda

liti. Di samping

u juga tergantung pertimbangan biaya, karena ada beberapa

.tetapi peralatan dan bahan pereaksi

harg

elumdipublikasi),

Metoda ini menggunakan alat dan pereaksi. Alat ini sangat

praktis, ringan, sehingga bisa dibawa ke lapangan, tidak tergan-

tung listrik karena dapat menggunakan baterai. Di samping itu

hasilnya sangat teliti, hanya ada ketergantungan pereaksi dan

kapiler, selain itu ternyata ada beberapa bahan yang belum ber-

edar di Indonesia.

Darah yang akan ditentukan kadar Hb-nya, dimasukkan ke

dalam suatu kapiler khusus mempunyai volume tertentu. Kapiler

yang berisikan darah tersebut kemudian dimasukkan ke dalam

tabung

Combur M1000. Pada layar baca a

unjukkan kadar Hb dalam g/dl

(10)

7) METODA HEMOCUE

Metoda ini merupakan pengembangan metoda penentuan

Hb secara spektrophotometer, karena menurut International

Committee of Standarization in Hematology (ICSH), dengan

adanya pengenceran yang terlalu tinggi pada persiapan sampel

darah sering menimbulkan penyimpangan hasil pembacaan alat

spektrophotometer. Di samping itu, padapersiapan sampel darah

sering timbul faktor kekeruhan sehingga terjadi kesalahan hasil

pembacaan.

Metoda HemoCue ini berdasarkan pengukuran optical

density pada kuvet yang mempunyai k

ikroliter oleh sinar yang berasal dari lampu yang berjarak

0,133 milimeter sampai pada dinding paralel celah optis tempat

kuvet berada.

Pereaksi kering dimasukkan dalam kuvet melalui dinding

bagian dalam kuvet, kemudian sampel darah dalam tabung

kapiler dimasukkan secara cermat ke dalam kuvet. Sampel darah

akan bercampur dengan pereaksi kering secara spontan. Kuvet

dimasukkan ke dalam alat HemoCue photometer untuk dilaku-

kan pembacaan pada panjang gelombang 565 dan 880 nm. Alat

akan menghitung sendiri sehingga angka yang muncul pada layar

pembacaan adalah kadar Hb darah yang diperiksa

(11)

Alat penentuan Hb dengan metoda HemoCue ini juga ringan

dibawa, praktis, dapat menggunakan baterai, tidak tergantung

listrik, dari hasilnya dapat langsung diketahui pada saat itu juga.

Dalam penetapan kadar Hb ada beberapa cara yang dapat

dilakukan seperti yang disebutkan di atas, yang masing-masing

mempunyai kelebihan dan keiemahannya. Untuk mem

yang akan digunakan tergantung berbagai pertimbangan, di

antaranya tujuan atau keperluan penetapan Hb, misalnya untuk

penelitianjelas memerlukan metoda yang lebih te

metoda walaupun teliti

anya relatif mahal. Situasi dan kondisi lapangan juga mem-

pengaruhi pemilihan metoda seperti ada tidaknya sarana listrik,

jauh tidaknya lapangan dan laboratorium dan lain-lain.

KEPUSTAKAAN

1. Anonim. Keadaan dan masalah gizi di Indonesia. Info Pangan dan Gizi.

Jaringan Informasi Pangan dan Gizi, Jakarta 1993; 5(4): 134.

2. Soewondo S. Krisdinamurtirin Y. Anemia and some aspects of mental

functioning. The Third Asian Congress of Nutrition. Jakarta, 1980; Oct.:

610.

3. Karyadi D. Hubungan ketahanan flsik dengan keadaan gizi dan anemi besi.

Tesis Doktor. Universitas Indonesia, Jakarta 1974.

4. Viteri FE, Torun E. Anemia and physical work capacity. Clin Haematol

1974; 3: 609626.

5. Muhilal, Sukati. Ketelitian hasil penentuan hemoglobin dengan cara

sianmethemoglobin, cara sahli, dan sianmethemoglobin tidak langsung.

Penelitian Gizi dan Makanan, 1980; 4: 1520.

6. WHO. Nutritional anemias. Tech Rep Ser no 503, 1972.

7. Gandasoebrata R. Penuntun laboratorium klinik. Dian Rakyat, Jakarta

1985.

8. Krupp MA, Sweet NJ, Jawetz E, Amstrong CD. Physician handbook, 9th

ed. California: Lange Med PubI 1956; P. 24556.

9. Muhilal dkk. Laporan Penelitian tentang Penentuan kadar hemoglobin

dengan alat artel di tingkatPuskesmas. PuslitbangGizi (b

1992.

10. Anonim. Ames mini lab pc-mini photometer. West Germany, 1990.

11. Schenck HV, Galkensson M, Lundberg B. Clinical Chemistry, 1986; 2(3):

52629.

12. WHO. Nutritional anemias; Report of WHO Scientific Group. Tech Rep

Serno4OS, 1968.

than the most effective book.

Dai1y life is more instructive

Cermin Dunia Kedokteran No. 103, 1995