Cermin Dunia Kedokteran

HASIL PENELITIAN

Efek Teratogen Fraksi Sisa Ekstrak

Daun Emilia sonchifolia (L)DC in ovo

Almandy A.

Jurusan Farmasi Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam,

Universitas Andalas, Padang

ABSTRAK

Uji teratogenitas dan toksisitas fraksi sisa ekstrak daun Emilia sonchifolia (L.)

DC telah dilakukan secara in - ovo pada telur puyuh.

Senyawa uji yang telah dilarutkan dengan larutan fisiologis steril dengan

volume 0,05 ml disuntikkan secara aseptic pada telur yang telah diinkubasi selama empat

hari. Kemudian telur diinkubasi sampai hari ke 13. Pada hari ke-14 embrio dikeluarkan.

Sebagian embrio direndam dalam larutan Bouin dan sisanya dalam larutan Alizarin merah.

Hasil menunjukkan bahwa tidak terlibat efek teratogen pada dosis 0.005 - 5,000 mg/

telur. Kematian embrio tergantung pada dosis yang diberikan.

PENDAHULUAN

Tumbuhan Emilia sonchifolia (L) DC secara tradisional di

Sumatera digunakan untuk mengobati demam, nyeri badan,

bisul dan reumatik. Pada pengujian sebelumnya telah diuji pula

efek antiinfamasi dan analgetik tumbuhan ini

(1,2)

Dalam usaha penemuan obat baru yang berasal dari

tanaman sebenamya tahap pengujian toksisitas dan keamanan

merupakan tahap awal yang harus dilalui, namun pada

kebanyakan penelitian tahap ini sering dilupakan.

Salah satu uji toksisitas yang disyaratkan derah uji

teratogenitas. Setiap senyawa yang memiliki efek teratogen

dapat dikembangkan menjadi obat dengan peringatan pemakaian

yang keras. Karena itu penelitian teratogen untuk senyawa bakal

obat, kosmetika dan makanan perlu dilakukan pada tahap awal.

Dalam British Pharmacopeia sifat teratogenitas suatu senyawa

obat telah dicantumkan dalam setiap pemberian senyawanya,

namun hal yang sama belum banyak ditemukan dalam

Farmakope Indonesia

Selain dengan cara in-vivo, uji teratogenitas dapat juga

dilakukan dengan cara in-ovo pada telur unggas. Di samping

cara ini dapat memprediksikan sifat toksisitas senyawa uji,

metade in-ovo dapat dilakukan dengan mudah dan biaya yang

murah

(3,4)

Makalah ini membahas hasil pengamatan toksisitas dan

teratogenitas senyawa Emilia sonchifolia (L.) DC secara in-ovo

dengan menggunakan telur puyuh sebagsi media uji.

BAHAN

Tanaman yang digunakan diperoleh dari daerah Lubuk

Minturun, Padang dan identifikasi dilakukan di Laboratorium

Taksonomi Jurusan Biologi Fakultas MIPA Universitas Andalas.

Media uji teratogenitas yang digunakan adalah telur puyuh

fertil jenis Coturnix-coturnix japonica yang dibeli dari

peternakan rakyat di kota Padang.

CARA KERJA

Penyiapan Sampel

Daun tanaman yang sudah dirajang lulus direndam dengan

etanol 96%. Setelah empat bari perendaman, sampel disaring

sehingga diperoleh sari etanol, ampas sampel direndam kembali

dalam etanol. Perlakuan yang sama dilakukan sampai empat kali.

Semua sari etanol dikumpulkan dan diuapkan dengan bantuan

pompa vakum sampai diperoleh sari yang kental. Sari kental

tensebut dikocok dengan petroleum eter dan dipisahkan. Bagian

petroleum dicuci dengan air. Sari air disari dengan kloroform,

dikocok dan dipisahkan, kemudian dicuci dengan air. Semua

Cermin Dunia Kedokteran No. 122, 1999 27

fraksi air dikumpulkan dan diuapkan dengan pompa vakum

sampai diperoleh fraksi sisa yang kental.

Penyiapan Dosis

Fraksi sisa ditimbang masing-masing 2, 4, 40, 400, 1200

dan 2000 mg dan masing-masing dilarutkan dalam larutan

Natrium Klorida steri10.9%sampai volume 20 ml. Senyawa uji

diatas dibaikan masing-masing sebanyak0,05 ml/telur sehingga

dosis yang diberikan adalah 0,(05; 0,010; 0,1;1,000; 3,000 dan

5,000. Dap kelompok dosis menggunakan tujuh both talur.

Pemberian Senyawa Uji

Senyawa uji diberikan pada hari ke-4 setelah inkubasi

dengan cara menyuntikan pada kuning telur. Bekas suntikan

ditutup dengan lilin steril. Telur diinkubasi sampai hari ke-13

pada suhu 38° - 39°C dengan kelembaban 65 - 80%. Pada hari

ke-14 inkubasi embrio dikeluarkan. Embrio dicuci, dikeringkan,

dan ditimbang. Sebagian direndam dalam larutan Bouin selama

14 hari untuk pengamatan bagian dalam nbuh dan sebagian

dengan larutan Alizarin selama 3 hari untuk pengamatan

pertulangan

(5,6,7)

HASIL DAN PEMBAHASAN

Dari 2,4 kg daun segar diperoleh fraksi sisa sebanyak 30,5

gram ekstrak kental. Fraksi sisa digunakan karena dari penelitian

terdahulu atas sejumlah fraksi ternyata fraksi sisa yang

menunjukkan efek farmakologis

(1,2)

Perlakuan secara in-ovo dilaksanakan dalam kondisi aseptis

agar kontaminasi mikroba yang mungkin menyebabkan kelainan

pada embrio dapat dihindari.

Hubungan berat badan embrio dengan dosis yang diberikan

dapat dilihat pada Tabel 1. Terlihat bahwa makin besar dosis

yang diberikan makin berkurang berat embrio. Berat embrio pada

kelompok kontrol (yang hanya diberi larutan fisiologis) dan

normal (yang tidak diberi apa-apa) secara statistik tidak

menunjukkan perbedaan yang berarti. Berat embrio dalam

pengamaan teratologi perlu diamati karena terdapat hubungan

kecacatan yang timbul dengan pengurangan berat

(8)

Tabel 1. Pengaruh peningkatan dosis terhadap persentase berat

rata-rata

embrio

(n=7)

Dosis

(mg/telur)

Persentase berat

Embrio rata-rata

Kontrol

Normal

0,005

0,010

0,100

1,000

3,000

5,000

57,93

57,96

57,98

58,00

58,21

58,03

57,85

57,17

Pengaruh peningkatan dosis terhadap kematian embrio dapat

dilihat pada Tabel 2. Pada kelompok kontrol dan normal serta

kelompok dosis 0,005 tidak menunjukkan kematian embrio;

dosis 0,01 sampai dosis 5 mg/telur menunjukkan persentae

kematian yang

meningkat.

Tabel 1. Pengaruh peningkatan dasis terhadap persen kematian

(n=7)

Dosis

(mg/telur)

Persentase berat

Embrio rata-rata

Kontrol

Normal

0,005

0,010

0,100

1,000

3,000

5,000

00,00

14,29

40,00

71,43

84,62

91,67

Hasil fiksasi dengan larutan Bouin dan Alizarin tidak

menunjukkan kelainan. Parameter yang diamati pada kelompok

yang direndam dengan larutan Bouin adalah langit-langit,

hati, ampela, serta kelompok mata dan bagian dalam perut.

Parameter yang diamati pada kelompok yang diperlakukan

dengan larutan Alizarin adalah semen pertulangan seperti tulang

kepala, rasa. sayap, tulang belakang dan tungkai sata tulang

jari, juga tidak menunjukkan kelainan.

Hasil pengamatan anti menunjukkan bahwa senyawa yang

dibaikan tidak menunjukkan adanya sifat teratogen, kecuali

kematian. Kematian dapat disebabkan sifat toksik senyawa

terhadap sel yang tumbuh secana bedebihan sementara terato-

gen disebabkan oleh gangguan senyawa terhadap bagian sel yang

penting pada masa organogenesis.

KESIMPULAN

Fraksi sisa ekstrak daun Emilia soncchifolia (L.) DC pada

dosis 0,005-5,000 mg/telur tidak memberikan efek teratogen

pada embrio telur puyuh.

Peningkatan dosis fraksi sisa ekstrak daun Emilia sonchtfolia

(L.) DC dengan dosis 0,005-5,000 mg/telur meningkatkan

persentase kematian embrio puyuh.

KEPUSTAKAAN

1. Bend W. Uji efek Antiinflamasi ekstrak Daun Emilia sonchifolia (L)

DC pada Mencit. Skripsi Sarjana Farmasi. FMIPA Unand. Padang 1992.

2. Nofimaldi, Uji efek Analgetik ekstrak Daun Emilia sonchifolia (L) DC

pada Mencit dengan metode Writing Test dan Tail Flik. Skripsi Sarjana

Farmasi, FMIPA Unand. Padang. 1993.

3. Kemper FH. Luepe NP Toxicity Testing by The Hens Egg Test (HET),

Fed Chem Toxic, 1986; 28 :6474

4. Karnofsky DA. The Chick Embryo in Drug Screening : Survey of

Teratological Effect Observed in The 4day Chick Embryo, Stan Med

Bull 1965; 13: 194201.

5. McManus JF. Staining Methods Histologic ad Histochemical. New

York: Harper & Row, 1964.

6. Wilson JG. Hand Book of Teratology. New York, Plenum Press. 1978.

7. Herbison RD, Teratogen, in : Cassaret and Douls Toxicology. New York:

McMillan Pub Coy; 1986

8. Castalo PJ. et al. Relationship between Fetal Weight and Mal-

formation in Developmental Abnormalities, Toxic And Appl Pharm.

1991; 119: 156165,

Cermin Dunia Kedokteran No. 122, 1999