Cermin Dunia Kedokteran

HASIL PENELITIAN

Pengaruh B. thuringiensis H-14

Formula Tepung pada Berbagai Instar

Larva Aedes aegypti di Laboratorium

Amrul Munif

Pusat Penelitian Ekologi Kesehatan , Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan

Departemen Kesehatan RI, Jakarta

ABSTRAK

Aedes aegypti merupakan salah satu vektor penyakit demam berdarah yang di-

sebabkan oleh virus dengue. Pengendalian populasi terhadap vektor (Ae. aegypti) telah

banyak dilakukan diantaranya dengan menggunakan insektisida baik terhadap dewasa

maupun pradewasa. Secara umum hasilnya memang memuaskan, namun penggunaan

insektisida yang terus menerus dapat merangsang timbulnya kekebalan pada Ae. aegypti.

Salah satu alternatif menggunakan cara menanggulangi permasalahan ini adalah dengan

pengendalian hayati dengan menggunakan Bacillus thuringiensis H- 14. Pentingnya

penggunaan B. thuringiensis H- 14 dalam formulasi tepung tidak menimbulkan efek

samping atau keracunan terhadap manusia maupun organisme yang bukan sasaran lain-

nya. Kejadian ini disebabkan karena daya racunnya yang spesifik terhadap serangga dan

mempunyai spektrum yang sempit. Pengujian B. thuringiensis H- 14 formula tepung pada

berbagai instar larva Ae. aegypti dilakukan dengan cara menyemprotkan B. thuringiensis

pada habitat larva Ae. aegypti dengan 4 macam konsentrasi dan 4 kali ulangan. Rancang -

an yang digunakan dalam penelitian ini adalah rancangan faktorial dengan variabel

macam konsentrasi, waktu dan banyaknya ulangan. Pengamatan dilakukan secara

langsung dengan melihat jumlah larva yang lumpuh selama satu jam dan jumlah larva

yang mati selama 48 jam kemudian dilakukan uji daya bunuh B. thuringiensis H-l4 setiap

satu minggu sekali sampai B. thuringiensis H- 14 tidak mempunyai daya bunuh.

PENDAHULUAN

Penyakit demam berdarah dengue telah menyebabkan ke-

sakitan dan kematian yang cukup tinggi setiap tahun. Pada tahun

1983 saja jumlah penderita sebanyak 11 .062 jiwa dengan angka

kematian 442 jiwa (CFR = 4,1%), kemudian pada tahun 1988

jumlah penderita 47.573 jiwa dengan angka kematian 1.527

(CFR = 3,2%); selanjutnya pada tahun 1991 jumlah penderita

sebanyak 21. 120 jiwa dengan angka kematian 578 jiwa (CFR=

2,8%) dan pada tahun 1993 jumlah penderita menurun menjadi

7.392 kasus dengan angka kematian 171 jiwa (CFR = 2,3%);

tahun 1993 jumlah penderita mencapai 14.427 jiwa dengan

angka kematian 461 jiwa (CFR = 3.4%). Kejadian luar biasa

penyakit DBD secara nasional terjadi setiap 5 tahun sekali.

Mengingat sampai saat sekarang belum diketemukan obat

untuk membunuh virus dengue, penanggulangan penyakit ini

berupaperawatan penderita dan pemberantasan vektor. Pengen-

dalian vektor secara kimia untuk memutuskan transmisi penyakit

dilakukan dengan fogging untuk membunuh nyamuk dewasa dan

larvasida dilakukan dengan menebar Abate pada tempat pem-

biakan nyamuk, juga melibatkan masyarakat berupa pembersih-

an sarang nyamuk di lingkungan daerah endemis.

Secara umum penggunaan insektisida sangat berhasil me-

ngendalikan beberapa jenis serangga pengganggu maupun hama;

namun penggunaan insektisida yang terus menerus akan me-

nyebabkan resistensi dari berbagai masalah lingkungan. Salah

satu cara untuk menanggulangi permasalahan tersebut adalah

Cermin Dunia Kedokteran No. 119, 1997 27

dengan pengendalian biotik atau cara hayati.

Pemberantasan dengan carapengendalian biotik merupakan

pengaturan populasi vektor oleh musuh-musuhnya di alam di

antaranya pemangsa, parasit, virus, bakteri maupun cacing yang

hidup pada tempat yang sama dengan cara menyebarkan agen di

tempat pembiakan vektor, sehingga dapat menurunkan populasi

vektor, di samping dampak terhadap lingkungan dapat diperkecil

(Debach, 1974).

Salah satu pengendali hayati yang sedang digalakkan

penggunaannya adalah Bacillus thuringiensis H-14 dengan ber-

bagai formulasi. B. thuringiensis dibagi menjadi beberapa varietas

atau subspecies berdasarkan H. antigen atau serotipe flagella dan

serotipe kristalnya (Aronson et al, 1986); merupakan basil gram

positifaerob artinya untuk pertumbuhannya memerlukan oksi-

gen, soliter atau berantai pendek. Bakteri ini berukuran panjang

35 mikron dan lebar 11,2 mikron. Endospora berbentuk batang

dan dapat menghasilkan endotoksin pada masa pembentukan

spora (Gibson and Gordon, 1974).

Karakteristik B. thuringiensis adalah kemampuannya untuk

menghasilkan endotoksin yang disebut paraspora crystal (kris-

tal paraspora) yang bersifat toksik terhadap serangga terutama

dari Ordo Diptera dan Lepidoptera (Baumen et al, 1984). Kristal

parasporal dapat berbentuk kubik. bipiramidal, ovoid ataupun

amorph; setiap sel bakteri dapat menghasilkan 2 sampai 3 kristal

parasporal (Tyrell et al, 1981).

Patogenitas B. thuringiensis berkaitan erat dengan toksin

yang dihasilkannya dan sampai saat ini telah diketahui ada 4 jenis

toksin yaitu eksotoksin alpha, eksotoksin beta, eksotoksin gamma

dan endotoksin delta. Eksotoksin alpha dan gamma tidak banyak

dibicarakan karena bukan merupakan komponen yang aktif me-

rusak tubuh induk semang (Burgerjon dan Martouret, 1971).

Eksotoksin beta disebut juga fly toxin atau fly vector yang sangat

toksik dan digunakan untuk membunuh larva Lepidoptera,

Hymenoptera dan Diptera. Toksin ini larutdalam air, tahan panas

dan akan merembes ke dalam media fermentasi padat selama

proses pertumbuhan vegetatif (Dubois dan Lewis, 1981). Ekso-

toksin beta ini terbukti toksis terhadap larva serangga pada fase

pergantian kulit atau selama proses metamorfosa. namun se-

baliknya tidak toksis terhadap serangga dewasa (Bond et al,

1971).

Eksotoksin beta terdiri dari adenin, gula ribosa dan fosfat

dengan perbandingan masing-masing berbanding satu. Ekso-

toksin beta ini mempunyai struktur yang mirip dengan ADP dan

ATP, bekerja menghambat sintesis RNA, terutama RNA poli-

merase yang memenlukan DNA untuk bergerak di sepanjang utas

yang akan ditranskripsi menjadi RNA. Enzim ini memerlukan

empat ribonukleosida tri fosfat (ATP, GTP, CTP dan UTP);

karena struktur eksotoksin beta mirip dengan ATP maka akan

mengakibatkan pertumbuhan rantai RNA terhenti (Sabesta dan

Horska, 1970).

B. thuringiensis menginfeksi inang masuk melalui mulut,

setelah sampai di usus sporanya akan pecah dan menembus

dinding sel. Kemudian masuk ke haemocoel dan berkembang

dalam haemolymph. Dari sinilah baru tersebar ke seluruh tubuh

induk semangnya. Daya racun dari B. thuringiensis disebabkan

oleh larutnya elemen toksik yang terdapat di dalam spora. Proses

pelarutan ini berlangsung di dalam menesteron dengan me-

libatkan enzim proteolitik (Laksma dan Yoni, 1990). Akibat

pengaruh enzim proteolitik dan pH usus yang alkalis dalam

tubuh induk semangnya maka knistal-kristal akan lepas, se-

hingga toksinnya atau racunnya akan ke luar. Racun ini akan

menyebabkan terjadinya pembengkakan sel-sel epitel usus

tengah. Kerusakan struktur dan fungsi usus tengah ini menye-

babkan keseimbangan pH dan ion di dalam hemolimfe ter-

ganggu, akibatnya terjadi kelunipuhan yang mengakibatkan

kematian.

Efektivitas B. thuringiensis dipengaruhi oleh beberapa faktor,

salah satu di antaranya adalah formulasi yang diberikan pada

serangga sasaran dapat berbentuk granula, cair maupun tepung.

BAHAN DAN CARA KERJA

Bahan yang digunakan adalah larvasida Bacillus thu-

ringiensis H- 14 dalam bentuk tepung wadah air plastik dengan

ukuran 36,5 cm x 28,5 cm x 8 cm, air kran berasal dari air tanah,

larva Aedes aegypti dan berbagai instar, pH meter dan sebagai-

nya.

Metode penelitian menggunakan rancangan faktorial de-

ngan 4 macam dosis, terhadap perlakuan berbagai instar, selama

waktu 4 minggu dan masing-masing dikerjakan 4 ulangan. Apabila

dalam pengamatan ada perbedaan maka dilanjutkan dengan uji

beda nyata terkecil (BNT) (Steel and Tornie, 1991). Perlakuan

larvasida B. thuringiensis yang diuji cobakan terdiri dari 4 dosis

yaitu 832 mg/m

624 mg/m

416 mg/m

dan 208 mg/m

serta

kontrol tanpa perlakuan larvasida B. thuringiensis H- 14.

Ke dalam wadah air diisikan air kran sebanyak 4,5 liter;

sebanyak 20 wadah air digunakan sebagai tempat pengujian.

Kemudian pada setiap wadah yang telah terisi air dimasukkan

larva masing-masing 25 ekor. Selanjutnya setiap dosis larvasida

dimasukkan ke dalam alat semprot yang telah berisi air kran se-

banyak 0,5 liter. Penentuan dosis dan cara aplikasi ini disesuai-

kan dengan petunjuk WHO. Setelah larut homogen, disemprot-

kan ke dalarn permukaan air. Indikator kemampuan kerja larva-

sida B. thuringiensis H- 14 adalah pensentase kematian larva yang

ditandai seluruh tubuh larva berwarna hitam dihitung mulai dari

1 Jam, 2 jam, 4 jam, 24 jam dan 48 jam setelah kontak dengan B.

thuringiensis.

Untuk melihat lama kerja efektif B. thuringiensis H-14

formula tepung dalam membunuh larva Aedes aegypti, maka

setiap minggu dimasukkan kembali 25 ekor larva dari berbagai

instar ke dalam wadah air yang telah mengandung B. thuringien-

sis H-14. Pengamatan dilakukan setelah 24 jam aplikasi dengan

melihat secara langsung dan menghitung jumlah larva yang mati.

Percobaan dihentikan apabila hasil pengamatan 0% untuk ke-

matian larva Ae. aegypti. Bila ternyata kematian larva kontrol

melebihi 15% maka data hasil pengujian harus dikoreksi dengan

formula ABBOT. (Brown and Pal, 1971)

Al = (A C) x 100%

100 C

dimana:

Cermin Dunia Kedokteran No. 119, 1997

Al = angka kematian setelah dikoreksi C = angka kematian

pada kontrol A = angka kematian pada perlakuan

HASIL DAN PEMBAHASAN

Secara kumulatif persentase kematian larva instar 1 lebih

tinggi jika dibandingkan dengan instar yang lebih lanjut, karena

larva instar 1 pertumbuhannya masih harus mengalami adaptasi

dengan lingkungannya; kejadian ini serupa dengan penelitian di

lapangan terhadap larva Culex quinquefasciatus instar awal

(Seregeg dan Sukirno, 1987). Selain itu mungkin instar lain da-

lam keadaan kenyang sehingga tingkat tertelannya B. thuringien-

sis H- 14 relatifrnenjadi rendah; karena ternyata B. thuringiensis

H-14 tidak dapat membunuh pupa serangga sasaran yang tidak

makan lagi, hal tersebut disebabkan karena proses infeksinya

melalui mulut dan pengaruhnya terjadi di dalam tubuh serangga

sasaran. Menurut Garcia dan Tozer (1976) larva Ae. aegypti

instar 4 lebih rentan dibandingkan dengan tingkat instar lainnya;

disebutkan juga bahwa tingkat kerentanan larva berbeda-beda

tergantung dari tingkat instar larva (Ghuterland dan Khoo, 1987).

Pernyataan di atas hampir sarna dengan hasil penelitian pada

instar 3 dan 4 (Tabel 1). Walaupun persentase angka kematian

pada instar I ini cukup tinggi namun kematian bukan hanya

disebabkan oleh infeksi B. thuringiensis H-l4 melainkan juga

oleh faktor lain; Larva instar I yang berumur beberapa jam belum

dapat beradaptasi dengan lingkungan atau mungkin untuk men-

dapatkan makanan masih sulit. Hal ini juga ditunjang dan hasil

pengamatan larva yang mati, warna tubuhnya tidak menghitam,

yang menandakan matinya larva bukan karena B. thuringiensis

H-14.

Kematian larva setelah kontak 48 jam dengan B. thuringien-

sis H-I 4dalam bentuk tepung ternyata bila dilihat dari dosis yang

digunakan, secara kurnulatif dosis terbesar yaitu 832 mg/m

dapat membunuh lebih banyak dibandingkan dengan dosis lain-

nya; bahkan pada seluruh instar semuanya mengalami kematian

100% (Tabel 1). Namun pada umumnya kematian larva pada

dosis terendahpun rata-rata cukup tinggi (86,1%); untuk memati-

kan separuh populasi larva uji, dosis yang diperlukan masih di

bawah 208 mg/m

sedangkan untuk mematikan 95% populasi

larva uji dosisnya di antara 416 mg/m

dan 624 mg/m

Tabel 1. Jumlah persentase kematian larva Aedes aegypti dari berbagai

instar setelah disemprot Bacillus thuringiensis H-14 formulasi

tepung dalam berbagai dosis setelah kontak 48 jam

Kematian larva instar (%)

Dosis

mg/m

Satu Dua Tiga

Empat

Jumlah

% rata

rata

kematian

208 100 56 95 94 345 86,1

416 100 76 96 96 371 92.7

624 99 96 98 100 393 98,2

832 100 100 100 100 400 1

(8)

Kemampuan daya bunuh B. thuringiensis H- 14 formula

tepung ternyata hanya bertahan sampai minggu ke tiga setelah

diaplikasikan pada instar larva 4; sedangkan pada instar larva 1,

2, dan 3 hanya bertahan sampai 2 minggu (Tabel 2). B. thu-

ringiensis H-14 formulasi tepung dengan dosis terendah 208 mg/

hanya membunuh 3% larva.instar satu pada minggu pertama

sedangkan dosis tertinggi hanya 38%. Pada minggu ke dua

dengan dosis 208 mg/m

daya kemampuan B. thuringiensis

membunuh larva menurun menjadi 0%, sedangkan pada dosis

yang tertinggi yaitu 832 mg/m

pada minggu ke dua hanya dapat

membunuh 10% dari seluruh larva uji.

Tabel 2. Jumlah kematian kumulatif berbagai instar larva Aedes aegypti

setelah diaplikasi B. thuringiensis H-14 kaitannya dengan waktu.

Waktu pengamatan (minggu)

( %)

Instar

Dosis

I II III IV

Jumlah

1 208 3 0 0 0 3

416

24 4 0 0 28

624

23 4 0 0 27

832

38 I 0 0 39

208

0 0 0

416 9 3 0 0 12

624

3 0 0

832

12 9 0 0 21

111

208 I 0 0 0 1

416 6 3 0 0 9

624

4 0 0

932

11 9 0 0 20

208 9 0 0 0 9

416

34 6 II 0 51

624

38 8 10 0 56

832

39 10 12 0 61

B. thuringiensis H- 14 formulasi tepung terhadap larva instar

dua pada minggu pertama dengan dosis 208 ing/m

mampu

membunuh 8% sedangkan pada dosis tertinggi yaitu 832 mg/m

daya bunuhnya mencapai 21%; pada minggu ke dua kemampuan

daya bunuh menurun yaitu pada dosis terendah tidak ditemukan

adanya larva yang mati, pada dosis tertinggi hanya rnencapai 9%.

Pada pengujian lebih lanjut pada minggu ke tiga dan empat pada

dosis terrendah maupun dosis tertinggi larva uji tidak ada yang

mati.

Terhadap larva instar ke III pada minggu pertama ternyata

pada dosis 208 mg/m

hanya mampu membunuh 1% dan dosis

832 mg/m

jumlah persentase larva yang mati hanya 11%. Per-

kembangan lebih lanjut pada minggu ke dua ternyata dengan

dosis terendah semua larva dalam keadaan hidup namun se-

baliknya pada dosis tertinggi angka kernatian larva mencapai

9%, sedangkan pada rninggu ke 3 dan 4 baik pada dosis tertinggi

maupun terendah jumlah angka kematian 0%.

Kemampuan daya bunuh B. thuringiensis H- 14 formula

tepung terhadap larva instar IV ternyata pada dosis terendah

persentase kematian mencapai 9% dan pada dosis tertinggi yaitu

832 mg/m

jumlah kematian mencapai 39% pada minggu per-

tama. Ternyata larva instar IV lebih rentan dibandingkan instar

lainnya pada pengujian minggu pertama. Pada minggu ke dua

hasil uji coba larva instar lV dengan dosis terendah tidak ada yang

mati sedangkan pathi dosis 832 mg/rn niencapai 10% larva yang

inati, sedangkan pada minggu ke empat semua larva dalam ke-

adaan hidup.

Dari hasil pengamatan di lapangan ternyata aktivitas larva-

sida B. thuringiensis H 14 cepat hilang jika diaplikasikan di

dalam air yang berlumpur karena bakteri tersebut diserap oleh

Cermin Dunia Kedokteran No. 119, 1997 29

partikel-partikel yang terdapat dalam lumpur. Besarnya persen-

tase bakteri yang diserap tersebut sangat tinggi mencapai 99,8%

dalam waktu 45 menit setelah aplikasi. Namun B. thuringiensis

H-14 masih mampu mempunyai daya bunuh 90% dan populasi

larva Ae. aegypti bila dipisahkan dari lumpur (Ohana et al, 1987).

Hasil analisis faktorial untuk mengetahui efektivitas B.

thuringiensis H-14 formula tepung terhadap larva Ae. aegypti

berdasarkan faktor waktu, variasi dosis, dan bentuk instar tertera

pada Tabel 3. Pada analisis sidik ragam ternyata F hitung > F

tabel, berarti ada perbedaan jumlah kematian larva yang ber-

makna antar perlakuan berbagai dosis B. thuringiensis H-14

formula tepung yang diberikan; sedangkan di antara berbagai

instar sendiri mempunyai perbedaan jumlah kematian larva yang

bermakna. Selanjutnya interaksi antara faktor dosis dan instar

diperoleh F hitung = 9,15 dan F tabel = 2,80 (a = 0,01) dan 2,08

(a = 0,05), hal ini berarti bahwa interaksi antar faktor dosis dan

instar terhadap jumlah kematian mempunyai hubungan yang

erat. Hasil uji BNT untuk kematian larva Ae. aegypti antar per-

lakuan dosis ternyata berbeda sangat nyata pada dosis 208 mg/m

(Tabel 4). Sedangkan hasil uji BNT untuk kematian larva Ae.

aegypti antar perlakuan instar memperlihatkan perbedaan yang

sangat nyata pada instar II.

Kematian larva Ae. aegypti yang disebabkan oleh B. thu-

ringiensis H-14 berdasarkan pengamatan selama penelitian di-

tandai dengan seluruh tubuh larva Ae. aegypti berwarna hitam,

disebabkan kristal yang tertelan larva yang melepaskan toksin

akibat keasaman tubuh larva Ae. aegypti; toksin yang keluar

mengakibatkan sel-sel di saluran pencernaan mengalami parali-

sis dan epitheliumnya hancur atau rusak (Munif, 1996).

Efektivitas B. thuringiensis H- 14 yang digunakan sebagai

pengendali hayati terhadap serangga dipengaruhi oleh sifat khas

spesies bakteri, metode pembiakan dan cara memformulasikan-

Tabel 3. Analisis sidik ragam jumlah kematian larva Aedes aegypti dengan

perlakuan penggunaan Basillus thuringiensis H-14 formula

tepung.

F tabel

Sumber

keragaman

Derajat

bebas

Jumlah

kuadrat

Kuadrat

tengah

F hitung

0,01 0,05

Dosis 3

115,3

38,43

16,2

4,2

Instar 3

182,05

60,7

25,5

4,2

2,8

Interaksi 9 196,01

21,8 9,2 4,2 2

Galat 48

114,25

2,4

Total 63

607,61

Tabel 4. Hasil uji beda nyata terkecil (BNT) jumlah kematian larva Ae.

aegypti antar perlakuan dosis aplikasi dan B. thuringiensis H-14

formula

tepung.

Dosis aplikasi

Dosis

mg/m

Rata-rata

832 mg/m

624 mg/m

416 mg/m

208 mg/m

832 25

624 24,56

0,44

416 23,19

1,81 1,37

208 21,56

3,44**

3,00**

1,63

BNT 5% = 2,21

BNT 1%= 2,95

Tabel 5. Hasil uji beda nyata terkecil (BNT) kematian larva Aedes aegypti

antar

perlakuan

instar.

Instar Rata-rata Satu Empat Tiga Dua

Satu 24,94

Empat 24,38 0,56

Tiga

24,31

0,63 0,07

Dua 19,44 5,5**

4,93**

4,87**

BNT 5% = 2,21

BNT 1 % = 2,95

Keterangan:

** = berbeda sangat nyata

berbeda

nyata

nya (Prihatingintyas, 1989). Walaupun bahan dasar pembuatan

biosida sama yaitu B. thuringiensis, namun pengaruhnya terha-

dap serangga dapat berbeda karena perbedaan bentuk keemasan

dan pembuatannya, sedangkan banyaknya toksin yang dihasilkan

tidak berbanding langsung dengan banyaknya kristal paraspora.

Juga suatu pembuatan yang berhasil menumbuhkan banyak

spora belurn menjamin akan memproduksi banyak kristal para-

spora yang menghasilkan toksin.

B. thuringiensis yang mempunyai daya insektisida yang

spesifik terhadap beberapa famili serangga dalam ordo diptera

saja mempunyai arti penting di masa depan sebagai pengendali

serangga karena aplikasinya akan sangat memperkecil kerusak-

an lingkungan dengan memperkecil risiko matinya serangga lain

ataupun mikroorganisrne yang bukan sasaran.

KESIMPULAN

1) Tingkat kerentanan larva Ae. aegypti berbeda-beda tergan-

tung tingkat instar larva dan instar larva 4 merupakan larva yang

paling rentan dibandingkan instar larva lainnya.

2) B. thuringiensis H- 14 formula tepung mempunyai kemam-

puan daya bunuh yang berbeda terhadap larva Ae. aegypti setelah

kontak 48 jam; dosis tertinggi yaitu 832 mg/m

merupakan dosis

yang efektif terhadap seluruh instar larva nyamuk.

3) B. thuringiensis H-14 formula tepung mempunyai daya

bunuh sampai minggu ke tiga pada dosis 832 mg/m

walaupun

persentase kematian larva hanya mencapai 12%. Sebaliknya

pada dosis terendah yaitu 208 mg/m

hanya mampu membunuh

dalam waktu 1 minggu.

4) Terdapat hubungan antara kemampuan membunuh larva

Aedes aegypti dengan besarnya dosis serta tingkatan instar larva.

KEPUSTAKAAN

1. Debach P. Biological Control by N Enemies. Canhridge University Press,

London. 1974.

2. Aronson A, Tyrell DJ. James PC, Bulla LA. Relationship of the syntheses

of spora coat protein and parasporal crystal protein in Bacillus

thuringiensis. J Bacteriol 1982; 151: 339410.

3. Gibson T, Gordon RE. Endospora Forming Rods and Cocci. Dalani

Bergey's Manual of Determinative Bacteriology. ed. 8. Baltimora: William

and Wilkins Company.

Cermin Dunia Kedokteran No. 119, 1997

4. Baumen L, Okamoto K, Unterman BM. Linch Ini. Baumen P. Phenotypic

characterization of Bacillus thuringiensis and Bacillus cereus. J Inverte

brate Pahtol 1984; 44: 3294 I.

5. Burgejon A, Martouret D. Determination and significance of the host

spectrum of Bacillus thuringiensis, Dalam Microbial Control of Insects

and Mites, London: Acad Press.

6. Bond RPM, Boyce CBC, Rogof FHM, Shieh TR. The Termostable Eco

toxin of Bacillus thuringiensis. Dalam: Microbial Control of Indect and

Mites. London: Academic Press. 1971.

7. Sabesta K, Horska K. Mechanism of inhibition of DNA depent RNA Poly

merase by ecotoxm of Bacillus thuringiensis, Biochem Biophys ACRA,

1970; 209: 35767.

8. Laksmayoni AMA. Uji biokimiawi terhadap isolasi Bacillus thuringiensis

dari peternakan ulat sutra di Kabupaten Sukabumi, Kediri dan Blitar.

Skripsi Sarjana FKH IPB Bogor. 1990.

9. Stell RQD, Tome JH. Pnnsip and Prosedur Stastisika. PT Gramedia Pu

saka Utama. Jakarta 1991 : h 210.

10. Brown AWA, Pal R. Insectisida Resistance in Arthropoda. WHO. Mono-

graph No. 38, 1971.

11. Seregeg, Sukirno M. Perbandingan pengaruh biosida Sandoz dengan

hactimos terhadap pencemar biologi Culex quinquefilsciatus dalam satu

uji coba lapangan di Jakarta, Indonesia. Bull Penelit Kes 1987; 15(1):

4550.

12. Garcia R, Tozer W. Endospora Forming Rods and Cocci. Dalam Bergeys

Manual of Determinative Bacteriol. ed. 8. Baltimore: William and Wilkins

Company, l974.

13. Hana B, Margaliti, Barak. 2,19 Fate of Bacillus thuringiensis sub spesies

israelisis under simulated field conditions. J App Environment Microbiol

1987; 53: 82831.

14. Munif A. Pengaruh beberapa dosis Bacillus thuringiensis formula granula

terhadap larva An. aconitus dan Culex quinquefasciates pada simulasi air

tergenang. Maj Kes Masy Indon 1996 tahun; XX(IV): S.

15. Prihatininatyas D. Pengaruh pemberian B. thuringiensis terhadap per-

kembangan stadion pradewasa lalat rumah Musca domestica. FKH - IPB.

Bogor. 1989.

Cermin Dunia Kedokteran No. 119, 1997 31