hasil penelitian

cdk 161/vol.35 no.2 Mar-Apr 2008

Histofi siologi Sel Endotel dan Sel Progenitor

Endotel dalam Sirkulasi Darah

Spooz!Lbsvoefoh

Bagian Anatomi-Histologi, Fakultas Kedokteran Universitas Sam Ratulangi, Manado

BCTUSBL

Sel mononuklear yang tidak tergolong sel darah pada sirkulasi darah tepi ternyata berperan pada keseha-tan

sistem kardiovaskuler. Peningkatan sel endotel pada sirkulasi darah tepi menunjukkan kejadian inflamasi pembu-

luh darah, sebaliknya peningkatan sel progenitor endotel dalam sirkulasi darah tepi menunjukkan sifat proteksi

terhadap pembuluh darah dan memperbaiki jaringan iskemik dengan reendotelialisasi dan neovaskularisasi.

Perlu upaya peningkatan sel progenitor endotel untuk mempertahankan kesehatan sistem kardiovaskuler.

Kata kunci. Sel endotel, sel progenitor endotel, kesehatan kardiovaskuler.

QFOEBIVMVBO

Dengan mikroskop cahaya dan pulasan rutin darah tepi

biasanya dapat dilakukan diferensiasi berbagai jenis sel

lekosit, eritrosit dan trombosit. Dengan teknik imuno-

histokimia ternyata di darah tepi juga dijumpai sel-sel

bukan termasuk sel-sel darah, yaitu sel endotel dan sel

progenitor endotel, yang terlihat sebagai sel mononuk-

lear biasa de-ngan mikroskop cahaya bia-sa

1,2

Hal ini dapat dimengerti sebab histogenesis awal

perkembangan sistem kardiovaskuler (vaskulogenesis)

dan hemopoietik dimulai berupa pembuluh darah primi-

tif di daerah

mesoderm chorionic yolk sac

pada hari

ke dua puluh setelah fertilisasi, diikuti dengan terben-

tuknya sistem sirkulasi primitif pada embrio yang se-

dang berkembang. Jadi terdapat sumber sel induk yang

sama antara komponen seluler sistem kardiovaskuler

dan komponen seluler sistem hemopoietik.

3,4,5

Timbul pertanyaan apakah terdapat hubungan antara

sel endotel dan sel progenitor endotel dalam sirkulasi

dengan keadaan sistem kardiovaskuler itu sendiri.

Dalam makalah ini akan dibahas histofisiologi sel en-

dotel dan sel progenitor endotel dalam sirkulasi.

FOEPUFM

Endotel yang menyusun lapisan

monolayer

permukaan

adluminal

sistem kardiovaskuler sebelum tahun 1960

dianggap hanya berfungsi sebagai lapisan sawar seder-

hana antara lumen pembuluh darah de-ngan jaringan

sekitarnya, sesuai dengan gambaran histologis yang

hanya memiliki sangat sedikit struktur organela. Pene-

litian-penelitian kemudian menunjukkan endotel memi-

liki fungsi yang sangat kompleks dalam mengendalikan

keseimbangan hemostasis sistem kardiovaskuler,

de-ngan menghasilkan berbagai bahan vasoaktif yang

tidak disimpan dalam sel tapi langsung dilepaskan ke

dalam darah atau sel/jaringan sekitarnya.

3,5,6

Tjgbu.tjgbu!vnvn!tfm!foepufm

Histogenesis sistem kardiovaskuler pada embrio

dimulai di daerah vaskulosa, permukaan

yolk sac

yang

berasal dari mesenkimal, dinamai sel angioblas atau

hemangioblas. Sel angioblas mengawali pembentu-

kan kapiler primitif, dinamakan vaskulogenesis.

1,5,7

Sel

angioblas berkemampuan berkembang menjadi sel

endotel dan sel-sel hemopoietik.

Sel angioblas yang

menjadi endotel kemudian membentuk jala-jala kapiler

dan jantung sejak masa-masa awal perkembangan

embrio; pada hari ke 32 setelah konsepsi denyut jan-

tung telah terdeteksi dengan ekokardiografi.

Pada tahun 1960 endotel berhasil dibiakkan dan de-

ngan kemajuan biomolekuler, terbukti endotel berpe-

ran sangat kompleks dalam mengatur hemodinamik

sistem kardiovaskuler.

Sel endotel berbentuk poligonal, lebar 10-15 m, pan-

jang 25-50 m dengan sumbu panjang mengikuti ali-

ran darah. Luas permukaan seluruh endotel manusia

bila direntangkan sekitar 150 m

pada bayi dan dapat

mencapai 1000 m

pada usia dewasa dengan jum-

lah sel sekitar 6 x 1013 dan berat kira-kira 1,5 kilo-

gram atau setara dengan berat hepar.

Tahun 1964,

dengan mikroskop elektron ditemukan batang-batang

kecil dalam sitoplasma sel endotel oleh Weibel dan

Palade, berpenampang 0,1 m dan panjang sampai 3

m, dinamai badan Weibel Palade. Badan Weibel Pa-

lade ini mengandung faktor

Von Willebrand

(faktor VIII)

suatu glikoprotein yang disintesis oleh sel endotel dan

disimpan di badan

Weibel Palade arteri

(satu-satunya

bahan yang disimpan dalam sel endotel). Faktor VIII

ini disekresikan ke dalam darah dan berfungsi untuk

agregasi trombosit. Faktor Von Willebrand ini dapat

dideteksi dengan teknik imnohistokimia, sekarang di-

gunakan sebagai

marker

sel endotel dewasa .

2,5,9,10,11

Hasil Penelitian

cdk 161/vol.35 no.2 Mar-Apr 2008

Sel endotel normal masa hidupnya mencapai 30 ta-

hun, dalam sediaan histologik sangat jarang terlihat

sel endotel dalam keadaan berproliferasi, hanya seki-

tar satu dari 10.000 atau 0.01%.

5,9,12

Gvohtj!tfm!foepufm

Endotel normal memiliki beberapa fungsi utama:

1. Garis pertahanan (sawar) terhadap hampir semua

elemen asing yang mencoba masuk ke dalam or-

gan;

. Tempat metabolisme, katabolisme senyawa-

senyawa tertentu, seperti Angiotensin Converitng

Enszym (ACE),

3. Tempat sintesis berbagai senyawa vasoaktif, seper-

ti:

Endothelium Derived Relaxation Factor

(EDRF),

prostasiklin dan Endothelium Derived Hyperpola-

rising Factor

(EDHF) bekerja sebagai vasodilator

dan antiagregasi trombosit, dan endotelin sebagai

senyawa vasokonstriktor;

4. Sebagai organ imunokompeten yang mensintesis

berbagai mediator inflamasi, mediator proliferasi

sel-sel subendotel dan sebagai membran trombo-

resisten yang menghasilkan berbagai faktor hemo-

statis.

3,6,8,13

Penelitian selanjutnya mendapatkan EDRF adalah gas nitrik

oksida (NO), berperan sentral dalam mengatur hemostatis

vaskuler, seperti: menghambat agregasi trombosit, meng-

hambat adhesi lekosit dan mempunyai efek antimitogenik.

3,13

Ejtgvohtj!!foepufm

Istilah disfungsi endotel kini banyak digunakan untuk me-

nyatakan adanya gangguan pada kemampuan res-pons

vasodilatasi terhadap asetilkolin, istilah ini bersifat san-

gat umum dan tidak spesifik menggambarkan kelainan

dasar endotel itu sendiri. Disfungsi endotel disebabkan

oleh menurunnya produksi NO atau penurunan aktivi-

tas NO meskipun produksinya normal karena dipenga-

ruhi oleh superoksida. Disfungsi endotel menyebabkan

berkurangnya daya pengendalian hemostatis vaskuler

dari endotel sehingga dapat menyebabkan kelainan de-

generatif pembuluh darah terutama aterosklerosis.

Roos dan Glomest (1976) pertama kali mempublikasi-

kan bahwa ateroma akan terbentuk di daerah endotel

yang dibuat cedera oleh balon kateter ; sehingga timbul

teori cedera endotel.

Ross selanjutnya menyatakan

bahwa aterosklerosis adalah penyakit inflamasi yang

menurunkan produksi dan aktivitas NO; keadaan ini ke-

mudian dikenal sebagai disfungsi endotel.

14,15,16

Berbagai keadaan dapat menyebabkan terjadi dis-

fungsi endotel. Studi Framingham menyimpulkan ber-

bagai faktor risiko yang berhubungan dengan penyakit

kardiovaskuler. Faktor-faktor risiko Framigham baik

faktor kovensional (faktor risiko mayor) maupun fak-

tor risiko nonkonvensional dapat mengakibatkan ter-

jadinya disfungsi endotel, kemudian memicu perkem-

bangan aterosklerosis.

17,18,19

Tfm! foepufm! cfstjslvmbtj! )

Djsdvmbujoh! Foepuifmjbm!

Dfmmt<!dFD

Kira-kira tiga puluh tahun lalu para ahli telah mengeta-

hui sel-sel mononuklear yang bersirkulasi bukan hanya

limfosit dan monosit saja, tapi masih terdapat bebera-

pa jenis sel lain, salah satunya adalah sel endotel.

Sel endotel yang berdeskuamasi dari endotelium, ma-

suk ke dalam

sistem sirkulasi perifer

dan dapat didetek-

si melalui ekspresi faktor

von Willebrand

(vWf) dan CD

146.

Normal dapat sekitar 0,5-2 buah sel/ml darah,

dapat meningkat 10 kali lipat atau lebih pada penyakit

kardiovaskuler, penyakit jaringan ikat, penyakit infeksi

dan hematologik. Meningkatnya cEC merupa-kan suatu

petanda adanya gangguan atau kerusakan vaskuler,

sebab itu juga dinamakan

Circulating Inflammatory En-

dothelial Cells

(IEC).

Peningkatan cEC akan mengek-

spresi molekul

Vascular Adhesion Protein-1

(VAP-1),

MHC class I-related chain A

(MICA),

inducible nitric ox-

ide synthase

(i-NOS) dan

neutrophil-activating chemokin

yang biasanya akan meningkat pada penyakit vaskuler.

Jumlah cEC berkorelasi positip dengan CRP pada ke-

adaan-keadaan inflamasi. Meningkatnya cEC yang ber-

hubungan dengan penyakit-penyakit inflamasi serta

peningkatan CRP, berhubungan dengan disfungsi endo-

tel.

Peningkatan cEC menandai ada-nya kerusakan en-

dotel oleh beberapa proses penyakit, seperti: sitotoksik

pada transplantasi, hipertensi pulmonal, septik sjok, he-

modialisis, inflamasi vaskulitis, diabetes, penyakit ginjal

dan akut miokard infark.

2,22,23

Masih belum jelas apakah

deskuamasi endotel akan menyebabkan hipertensi dan

vasospasme atau meningkatkan trombosis.

Dari beberapa penelitian hitung cEC dapat merupakan

cermin beberapa penyakit vaskuler dan disfungsi en-

dotel. Hitung endotel ini mungkin dapat dikembangkan

sebagai suatu marker baru dalam memprediksi be-

berapa jenis penyakit kardiovaskuler.

Tfm!Qsphfojups!Foepufm

Sudah menjadi perdebatan sejak beberapa waktu lalu

apakah sel-sel turunan hematopoietik, sekarang dikenal

sebagai sel progenitor endotel (SPE) berperan pada

proses angiogenesis postnatal, terutama pada perkem-

bangan tumor.

Vaskulogenesis postnatal ini baru mu-

lai terungkap pada beberapa tahun terakhir ini.

TFKBSBI!QFOFNVBO!TQF

Pada tahun 1977 Asahara dkk berhasil mengisolasi

populasi sel mononuklear dari darah perifer yang memi-

cdk 161/vol.35 no.2 Mar-Apr 2008

liki antigen permukaan CD34+ dan berpotensi berkem-

bang menjadi sel endotel.

Tidak lama setelah Asahara,

Shi dkk membuktikan bahwa sel mononuklear yang me-

miliki antigen permukaan CD34+ tersebut merupakan

derivat dari sel hemositoblas sumsum tulang, yang

in vi-

tro

akan berdiferensiasi menjadi sel endotel pada koloni

aorta yang diberi implant Dacron.

Npsgpmphj!TQF

Sejak penemuan di atas, sel mononuklear darah tepi

yang memiliki antigen permukaan CD34, diyakini ber-

asal dari sumsum tulang, sebab hemangioblas juga me-

milki antigen permukaan CD34, CD133 dan CD45.

1,25

Beberapa waktu kemudian berhasil diidentifikasi 3

marker

spesifik pada permulaan perkembangan SPE,

yaitu: CD133 (AC133), CD 34 dan

Vascular Endothelial

Growth Factor Receptor-2

(VEGFR-2), juga dinamakan

kinase insert domain receptor

(KDR) atau Flk-1.

Sel

ini terutama masih terdapat dalam sumsum tulang ke-

mudian akan masuk ke dalam sirkulasi perifer; CD133

mulai akan menghilang tapi CD34 dan VEGFR-2 masih

tetap ada. Perkembangan selanjutnya menjadi sel endo-

tel CD34 sudah menghilang tinggal VEGFR-2 dan mulai

terekspresi VE-cadherin dan faktor von Willebrand

saja.

CD133 sudah tidak terdeteksi pada permukaan

sel endotel vena umbilikalis manusia.

Histologis sel CD34+ asal kultur terlihat sebagai sel

kecil bulat dan menjadi lebih besar dengan sitoplas-

ma lebih banyak setelah hari ke dua. Proliferasi sudah

mulai terlihat pada hari ke tiga. Sel-sel tersebut akan

melekat pada media yang diberi fibronektin. Setelah

melekat pada media fibronektin morfologiknya dapat

dari bulat kecil, bulat besar atau berbentuk spindel.

Sel-sel SPE berbentuk spindel ini banyak menyusun

daerah neovaskularisasi tumor.

Sejak mobilisasi sel progenitor dari sumsum tulang

masuk sirkulasi, terjadi pematangan sel-sel tersebut

secara bertahap. Mula-mula sel progenitor tersebut

memiliki CD133, masuk sirkulasi mulai muncul CD34

dan CD133 mulai menghilang, diikuti dengan munculnya

marker-marker VEGFR-2,

VE-cadherin

dan faktor von

Willebrand.

1,30,31,32

Penelitian Friedrich dkk atas ateroek-

tomi koronaria manusia menunjukkan SPE subpopulasi

CD34-/133+ lebih banyak pada plak yang stabil diband-

ingkan dengan subpopulasi CD34+/133+. Pada tikus

percobaan dengan penyuntikan sel SPE subpopulasi

CD34-/133+ ternyata lebih banyak sel endotel yang ter-

transplantasi pada arteri karotis dibandingkan dengan

subpopulasi CD34+/133+. Hasil penelitian ini menun-

jukkan bahwa SPE subpopulasi CD34-/133+ atau yang

lebih muda, lebih poten terhadap regenerasi vaskuler.

Qfsbo!TQF!qbeb!sffoepufmjbmjtbtj!ebo!ofpwbtlvmbsjtbtj

Reendotelialisasi (regenerasi endotel) dan neovasku-

larisasi merupakan kunci pengobatan kualitas pembu-

luh darah dan memperbaiki keadaan iskemi jaringan.

Sebaliknya pada tumor menghambat neovaskularisasi

berakibat menghambat perkembangan tumor.

Sffoepufmjbmjtbtj

Penelitian saat ini menunjukkan reendotelialisasi bera-sal

dari sel-sel SPE. Pada cedera endotel yang dibuat den-

gan implan Dacron pada anjing, beberapa saat kemu-

dian permukaan daerah implan akan ditutupi oleh sel-sel

CD34+.

24,33

Permukaan ventrikel manusia yang dipasangi

alat akan tertutupi oleh sel hemopoietik immatur CD133+,

bersamaan dengan terekspresinya reseptor VEGF-2.

Walter dkk memperlihatkan SPE dapat homing ke bagian

endotel yang dicederai dengan balon kateter.

Transplan-

tasi sel-sel turunan sumsum tulang dapat menyebabkan

reendotelialisasi pada endotel yang dibuat cedera.

35,36

Regenerasi endotel dapat mengurangi restenosis dan

penipisan miointimal dinding arteri secara bermakna,

karena endotel tersebut telah dapat mensintesis kem-

bali bahan antiproliferasi terutama nitrik oksida (NO).

Hasil penelitian di atas menunjukkan SPE dapat memper-

baiki integritas endotel yang monolayer dengan menem-

pati bagian-bagian endotel yang cedera atau disfungsionil.

Ofpwbtlvmbsjtbtj

Neovaskularisasi

merupakan langkah penting dalam me-

nyelamatkan jaringan

iskemi

, sebaliknya

neovaskularisasi

akan mempercepat pertumbuhan tumor. Infus sel-sel

yang diambil dari sumsum tulang atau sel-sel sumsum

tulang yang dibiak ex vivo akan meningkatkan densitas

kapiler dan neovaskularisasi di jaringan iskemik.

Pada

model miokard infark binatang percobaan, infus SPE atau

stem sel sumsum tulang, memajukan vaskularisasi da-

rah dan fungsi jantung serta mengurangi pembentukan

jaringan ikat ventrikel kiri secara bermakna.

37,38

Pemberian sel CD34, CD133, SPE, MAPC (mesenchy-

mal stem cell) memberi efek neovaskularisasi sama

baik, tapi bila digunakan sel-sel SPE atau sel

progenitor

berbentuk spindel yang lebih matur efek neovaskulari-

sasinya lebih rendah.

Aktivitas sel progenitor dalam

meningkatkan neovaskularisasi tergantung dari jenis

sel yang digunakan.

Jumlah SPE yang bersirkulasi akan menentukan daya

reendotelialisasi dan neovaskularisasi; peningkatan SPE

akan menurunkan risiko penyakit kardiovaskuler iskemik

atau berkorelasi negatif dengan skor faktor risiko pe-

nyakit kardiovaskuler dari Framingham.

Peningkatan

cdk 161/vol.35 no.2 Mar-Apr 2008

SPE dalam sirkulasi tergantung dari daya mobilisasi sel

stem sumsum tulang masuk ke sirkulasi darah. Rendo-

telialisasi dan neovaskularisasi tergantung pada mobil-

isasi, homing, diferensiasi, adhesi, migrasi transendotel,

kemotaksis, migrasi dan invasi SPE.

25,37,40,41

Peningkatan SPE dalam sirkulasi penting karena berkorela-

si positif dengan reendotelialisasi dan neovaskularisasi, yang

berhubungan erat dengan kesehatan kardiovaskuler.

Penelitian menunjukkan beberapa faktor pertumbu-

han/sitokin, bahan farmakologis dan latihan fisik dapat

meningkatkan cEPCs.

Granulocyte Colony-Stimulating Factor

(G-CSF) dapat

meningkatkan jumlah SPE dan

homing receptors

sel

endotel penderita penyakit jantung koroner.

Perco-

baan binatang menunjukkan

Granulocyte-Monocyte

Colony-Stimulating Factor

(GM-CSF) dan

Stromal cell-

Derived Factor

(SDF)

intramiokardial

akan memobil-

isasi SPE dan

neovaskularisasi

daerah iskemik jantung

sehingga terjadi remodelling ventrikel kiri dan kema-

juan fungsi kontraksi miokardium.

Eritropoietin (Epo) dapat merangsang proliferasi sel

stem hematopoietik dan meningkatkan jumlah SPE

pada penelitian-penelitian in-vivo. Pemberian Vascular

Endothelial Growth Factor (VEGF) juga akan mening-

katkan cEPCs sebanyak 2,1 kali.

Bahan-bahan farmakologis seperti: HMG-CoA reduk-

tase (statin), estrogen dan rosiglitasone meningkat-

kan SPE. Latihan fisik teratur juga dapat meningkatkan

SPE dalam sirkulasi.

LFNVOHLJOBO!BQMJLBTJ!LMJOJL!FQDt!

Beberapa penelitian mulai dilakukan untuk menjajaki

penggunaan SPE dalam klinik meskipun dasar bio-

molekuler SPE belum dipahami secara menyeluruh, be-

berapa penelitian menunjukkan hasil menjanjikan. Peneli-

tian terutama dilakukan pada binatang percobaan.

Pada tikus percobaan, arteri karotis dibuat cedera, ke-

mudian ke dalam lumen arteri tersebut ditransplantasi

SPE dari kultur; terjadi reendotelialisasi yang cepat dis-

ertai peningkatan fungsi endotel dan dapat mencegah

perkembangan ateroma di daerah tersebut.

45,46

Pada percobaan pengikatan arteri koronaria desend-

ing anterior sinistra jantung tikus, kemudian diberi SPE

(CD34+)

intramiokardial

melalui kateter; terjadi pening-

katan neovaskularisasi pada miokardial yang iskemik.

Pada tikus-tikus yang jantungnya dibuat iskemik dengan

mengikat

arteri coronaria desending anterior sinistra

pemberian SDF, GM-CSF atau kombinasi keduanya

ternyata akan meningkatkan SPE, neovaskularisasi,

memperbaiki geometri dan kontraktilitas jantung yang

telah mengalami kardiomiopati iskemik.

43,48,49

Penderita penyakit obstruksi arteri perifer ternyata

memiliki daya angiogenik yang rendah disebabkan

menurunnya ekspresi molekul spesifik SPE dalam

sumsum tulang dan darah. Transplantasi sel mono-

nuklear sumsum tulang akan meningkatkan SPE dan

kemajuan gejala iskemik tungkai.

Penelitian Werner dkk dari Maret 2003 - Januari 2004

terhadap 519 penderita penyakit jantung koroner yang

semua-nya dibuktikan angiografi koroner. Mereka diob-

servasi selama 12 bulan untuk melihat hubungan antara

SPE dengan kejadian penyakit jantung koroner. Ternya-

ta di kalangan penderita dengan kadar SPE yang lebih

tinggi, angka kematian akibat penyakit kardiovaskuler,

kejadian penyakit kardiovaskuler berat, revaskularisasi

dan hospitalisasi lebih rendah. Tetapi kadar SPE sendiri

tidak dapat memprediksi terjadinya miokard infark atau

kematian akibat penyakit kardiovaskuler.

Penderita penyakit jantung koroner memiliki SPE lebih

rendah dibandingkan dengan kontrol sehat dan akan

berespon terhadap sitokin G-CSF dalam meningkat-

kan SPE dan ekspresi homing reseptor yang dapat

meningkatkan neovaskularisasi.

QFOVUVQ

Di darah tepi terdapat sel-sel mononuklear bukan sel

darah, sel endotel berasal dari endotel pembuluh darah

dan sel progenitor endotel berasal dari sumsum tulang.

Pada penyakit-penyakit tertentu, seperti penyakit kardio-

vaskuler, penyakit jaringan ikat, penyakit infeksi dan he-

matologik akan lebih banyak sel endotel yang terlepas.

Makin tinggi sel progenitor endotel di dalam sirkulasi ma-

kin protektif terhadap pembuluh darah terutama untuk

reendotelialisasi dan neovaskularisasi jaringan iskemik.

Diharapkan jumlah sel endotel dan sel progenitor

dapat digunakan sebagai indikator penyakit kardio-

vaskuler di kemudian hari.

EBGUBS!QVTUBLB

1. Asahara T, Murohara T, Sullivan A, Silver M, Zee R, Tong L, Witzen-

bichler B, Schatlemen G, Isner JM . Isolation of putative progenitor

endothelial cells for angiogenesis. Science 1997;275:964-7.

2. Blann AD, Pretorius A. Circulating Endothelial Cells and Endothelial

Progenitor Cells: Two side of the same coin, or two different coin?.

www.elsevier/locate/atherosclerosis, Elsevier Ireland Ltd., 2006:

Down load 25 April 2006.

3. Karundeng R. Angiologi morfofungsional sistem vaskuler. Manado. FK

Unsrat 1995. p.66-116.

4. Risau W. Mechanisms of angiogenesis. Nature 1997; 386:671-4

5. Fawcett DW. Bloom, Fawcett A Textbook of Histology 12th ed, New

cdk 161/vol.35 no.2 Mar-Apr 2008

York: Chapman & Hall 1994; p 133.

6. Vane JR, Anggard EE, Botting RM. Regulatory function of the Vascular

Endothelium. N Engl J Med. 1990; 233: 27-30.

7. Folkman J. Shing Y. Angiogenesis. J Biol Chem 1992; 267: 10931-4

8. Camilleri JP. The Normal Arterial Wall in Hypertension and Arterial

Aging. Monograf. Les Laboratories Servier 1989.

9. Junquiere LC, Carneiro J. Basic Hstology 7th ed. New Jersey, Lange

Med. Publ., Los Angeles California 1989:95 (57)

10. Leeson TS, Leeson CR, Paparo AA. The Circulatory System in Text/At-

las of Histology. Philadelphia, WB. Saunders; 1988: 309-330 (58)

11. Barber CL, Iruela-Arispe ML. The Ever-Elusive Endothelial Progenitor Cell: Identi-

ties, Function and Clinical Implication. Pediatr 2006; res 59: 26R-32R. (60)

12. Fenton RG, Longo DL. Cancer cell biology and angiogenesis. In: Kasper

DI, Braunwald E, Fauci AS, Hauser SL, Longo DL, Jameson JL (eds).

Harrison Principles of Internal Medicine 16th ed. Vol I, New York Mc-

Graw-Hill 2005. p.453-64.

13. Baraas F. Stres oksidatif, disfungsi endotel dan faktor resiko aterosklerosis

: dimana letak hubungannya?. Penyakit kardiovaskular dari pediatrik sam-

pai geriatrik. Kaligis RWM, Kalim H, Yusak M, Ratnaningsih E, Soesanto A.

(Eds). Balai Penerbit RS Jantung Harapan Kita 2001;167-77.

14. Roos R. The pathogenesis of atherosclerosis : an update. N Engl J

Med 1986;314:488-98.

15. Roos R. Atherosclerosis-an inflammatory disease. N Engl J Med

1999;340:115-26.

16. Wijaya A. Disfungsi endotil aterosklerosis dan trombosis. Forum Di-

agnosticum Prodia 1988;1:1-23.

17. Chobanian AV, Bakris GL, Black HR, Cushman WC, Green LA, Izzo JL, Jones

DW, Materson BJ, Oparil S, Wright JT, Roccella EJ. the National High Blood

Pressure Education Program Coordinating Commitee. The Seventh Report

of the Joint National Committee on prevention, detection, evaluation, and

treatment of high blood pressure. JAMA 2003;289:2534-2573.

18. Libby P. Prevention and Treatment of Atherosclerosis. Kasper DI,

Braunwald E, Fauci AS, Hauser SL, Longo DL, Jameson JL(eds). In

Harrison Principles of Internal Medicine 16th ed. Vol II, New York Mc-

Graw-Hill 2005. p.1430-1433.

19. Wijaya A, Kurniasih R. High sensitivity c-reactive protein (hs-CRP)

suatu petanda untuk menentukan resiko penyakit jantung koroner

yang menjanjikan. Forum Diagnosticum Prodia 2001; 2:1-15.

20. Makin A, Chung NAY, Silverman SH. Assessment of endothelial dam-

age in atherosclerotic vascular disease by quantification of circulating

endothelial cells. Eur Heart J 2004; 25: 371-6.

21. Holmen C, Elsheikh E, Stenvivkel P, Qureshi AR, Petersson E, Jalkanen S,

Sumitran-Holgersson S. Circulating inflammatory endothelial cells con-

tribute to endothelial progenitor cell dysfunction in patients with vasculi-

tis and kidney involvment. J Am Soc Nephrol 2005, 16: 3110-20.

22. Quilici J, Banzet N, Paule P. Circulating endothelial count as a diagnostic marker for

non-ST elevation acute coronary syndrom. Circulation 2004; 110: 1586-91.

23. Mutunga M, Fulton B, Bullock R. Circulating endohelial cell in patient

with septic shock. Am J Respir Crit Care Med 2001; 163: 195-200.

24. Shi Q, Rafii S, Wu MH, Wijelath ES, Yu S, Ishida A, Fujita Y, Khotari S, Mohle

R, Sauvage LR, Moore MA, Strob RF, Hammond WP. Evidence for circulat-

ing bone marrow-derived endothelial cells. Blood 1998; 92:362-7.

25. Urbich C, Dimmeler S. Endothelial progenitor cells. Characterization

and role in vascular biology. Circ Res. 2004;95:343-53

26. Peichev M, Naiyer AJ, Pereira D, Zhu Z, Lane WJ, William M, Hicklin

DJ, Witte L, Moore MA, Rafii S. Expression of VEGFR-2 and AC133

by circulating human CD34+ cell identifies a population of functional

endothelial precussor. Blood 2000; 95: 952-8.

27. Yin AH, Miraglia S, Zanjani ED, Almeida-Porada G, Ogawa M, Leary

AG, Olweus J, Kearny J, Buck DW. AC 133, a novel marker for human

hematopoietic stem progenitor cells. Blood 1997; 90: 5002-12.

28. Fan CL, Li Y, Gao PJ, Liu JJ. Zhang XJ, Zhu DL. Differentiation of endo-

thelial progenitor cells from human umbilical cord blood CD34+ cell

in vitro. Acta Pharmacol Sin 2003: 24 (3) 212-8.

29. Vajkoczy P, Blum S, Lamparter M, Mailhammer R, Erber R, Engelhardt B,

Vestweber D, Hatzopoulos AK. Multistep nature of microvascular recuit-

ment of ex vivo-expanded embryonic endothelial progenitor cells during

tumor angiogenesis. T J Experiment Med 2003; 197: 1755-65.

30. Friedrich EB, Walenta K, Scharlau J, Nickenig G, Werner N. CD34-/

CD133+/VEGFR-2+ endothelial progenitor cell subpopulation with

potent vasoregenerative capacities. Circulation Res. 2006; 98: 20.

31. Hristov M, Erl W, Weber P. Endothelial progenitor cells. Mobilization, differ-

entiation and homing. Aterioscler Thromb Vasc Biol.2003;23:1185-9.

32. Aoki M, Yasutake M, Murohara T. Derivation of functional endothelial

progenitor cells from human umbilical cord blood mononuclear cell iso-

lated by a novel cell filtration device. Stem cell 2004; 22: 994-1002.

33. Quirici N, Soligo D, Caneva L, Servida F, Bollolasco P, Deliliers GL. Dif-

ferentiation and expansion of endothelial cells from human bone mar-

row CD133+ cells. Br J Haematol 2001;115:186-194

34. Peichev M, Naiyer AJ, Pereira D, Zhu Z, Lane WJ, Williams M, Oz MC,

Hicklin DJ, Witte L, Moore MA, Rafii S. Expression of VEGFR-2 and

AC133 by circulating human CD34(+) cell identifies a population of

functional endothelial precursor. Blood 2000;95: 952-958.

35. Walter DH, Ritting K, Bahlmann FH, Kirchmair R, Silver M, Murayama T, Nishimu-

ra H, Losordo DW, Asahara T, Isner JM. Statin therapy accelerates reendothe-

lialization: a novel effect involving mobilization and incorporation of bone marrow-

derived endothelial progenitor cells. Circulation 2002;105:3017-3024.

36. Werner N, Junk S, Laufs U, Link A, Walenta K, Bohm M, Nickenig G.

Intravenous transfusion of endothelial progenitr cells reduces neo-

intima formation after vascular injury. Circ Res. 2003;93:e17-e24.

37. Ruel M, Suuronen EJ, Song J, Kapila V, Gunning D, Rubens FD, Me-

sana TG. Effect of off-pump versus on-pump coronary artery bypass

grafting on function and viability of circulating endothelial progenitor

cells. J Thorac Cardiovasc Surg 2005;130:633-639.

38. Kawamoto A, Gwon HC, Iwaguro H, Yamaguchi JI, Uchida S, Masuda

H, Silver M. Endothelial progenitor cell for myocardial ischaemia. Cir-

culation 2001; 103:634-637.

39. Hill JM, Zalos G, Halcox JP, Schenke WH, Waclawiw MA, Quyyumi AA,

Finkel T. Circulating endothelial progenitor cell, vascular function, and

cardiovascular risk. N Engl J Med 2003; 348: 593-600.

40. Vajkoczy P, Blum S, Lamparter M, Mailhammer R, Erber R, Engelhardt

B, Vestweber D, Hatzopoulos AK. Multistep nature of microvascular

recruitment of ex vivo-expanded embryonic endothelial progenitor

cells during tumor angiogenesis. J Exp Med. 2003;197:1755-1765.

41. Carlos TM, Harlan JM. Leukocyte-endothelial adhesion molecules.

Blood 1994;84:2068-2101.

42. Powell TM, Paul JD, Hill JM, Thompson M, Benjamin M, Rodrigo M,

McCoy P, Read EJ, Khuu HM, Leitman TF, Finkel T, Cannon RO. Granu-

locyte Colony-Stimulating Factor mobilized functional endothelial pro-

genitor cells patient with coronary artery disease. Arterioscler Tromb

Vasc Biol. 2005;25:296-301.

43. Woo YJ, Grand TJ, Berry MF, Atluri P, Moise MA, Hsu VM, Cohen J,

Fisher O, Burdick J, Taylor M, Zentko S, Liao G, Smith M, Kolakowski

S, Jayasankar V, Gardner T, Sweeney HL. Stromal cell-derived factor

and granulocyte-monoctye colony-stimulating factor form a combined

neovasculogenic therapy for ischemic cardiomyopathy. J Thorac Car-

diovasc Surg 2005;130:321-9.

44. Heeschen C, Aicher A, Lehmann R, Fichtlscherer S, Vasa M, Urbich

C, Mildner-Rihm C, Martin H, Zeiher A, Dimmeler S. Erythropoietin is

a potent physiologic stimulus for endothelial progenitor cell mobiliza-

tion. Blood 2003;102:1340-6.

45. He T, Smith LA, Harrington S, Nath SH, Caplice NM, Katusic ZS.

Transplantation of circulating endothelial progenitor cells restores

endothelial function of denuded rabbit carotid arteries. Stroke

2004;35:2378-84.

46. Griese DP, Ehsan A, Melo LG, Kong D, Zhang L, Mann M, Pratt RE,

Mulligan RC, Dzau VJ. Isolation and transplantation of autologous cir-

culating endothelial cells into denuded vessels and prosthetic graft.

Circulation 2003;108:2710-15.

47. Kawamoto A, Tkebuchava T, Yamaguchi J-I, Nishimura H, Uchida S,

Masuo O, Iwaguro H, Ma H, Hanley A, Silver M, Losordo DW, Isner

JM, Asahara T. Intramyocardial transplantation of autologous endo-

thelial progenitor cells fot therapeutic neovascularization of myocar-

dial ischemia. Circulation 2003;107:461.

48. Fazel S, Chen L, Weisel RD, Fazel A, Cheung P, Lam J, Fedak PWM,

Yau TM, Li R-K. Cell transplantation preserves cardiac function after

infraction by infarct stabilization: augmentation by stem cell factor. J

Thorac Cardiovasc Surg 2005;130:1310-1318.

49. Kawamoto A, Murayama T, Kusano K, Ii M, Shintani S, Iwakura A,

Johnson I, Samson P, Hanley A, Gavin M, Curry C, Silver M, Ma H, Los-

ordo DW. Synergistic effect of bone marrow mobilization and vascu-

lar endothelial growth factor-2 gene therapy in myocardial ischemia.

Circulation 2004;110:1398-1405.

50. Yamamoto K, Kondo T, Suzuki S, Izawa H, Kobayashi M, Emi N, Komori K,

Naoe T, Takamatsu J, Murohara T. Molecular evaluation of endothelial

progenitor cells in patients with ischemic limbs: therapeutic effect by stem

cell transplantation. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2004;24:192-196.

51. Werner N, Kosiol S, Schiegl T, Ahlers P, Walenta K, Link A, Bohm M,

Nickening G. Circulating endothelial progenitor cells and cardiovascu-

lar outcomes. N Engl J Med 2005;353:999-1007.