Cermin Dunia Kedokteran

HASIL PENELITIAN

Penelitian Aktivitas Biologik

Infus Benalu Teh (Scurulla

atropurpurea Bl. Danser) terhadap

Aktivitas Sistim Imun Mencit

M. Wien Winarno, Dian Sundari, Budi Nuratmi

Pusat Penelitian dan Pengembangan Farmasi, Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan RI, Jakarta

ABSTRAK

Telah dilakukan penelitian aktivitas biologik infusum benalu teh (Scurulla

atropurpurea (BI) Danser) terhadap aktivitas sistem imun pada mencit. Bahan yang

diteliti dalam bentuk infusum dengan dosis pemberian 15 mg, 75 mg, 150 mg, dan

1500 mg/100 gram bb. Sebagai pembanding digunakan akuades.

Infus diberikan secara oral, 1 kali sehari selama 7 hari berturut-turut, setelah

imunisasi dengan sel darah merah domba. Pengamatan meliputi berat limpa dan

pengukuran konsentrasi lg G. Selain itu dilakukan penentuan LD

menggunakan

hewan tikus putih, dengan cara Thompson-Weil.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian infusum benalu teh pada semua

dosis tidak menunjukkan perbedaan nyata terhadap berat limpa dan konsentrasi lg G

(P>0,01), tetapi pada pengamatan konsentrasi lg G setiap minggu, terlihat pola

perkembangan yang meningkat terutama pada dosis 150 mg/100 g bb. yaitu 97,0

mg/dl. Penghitungan LD

mendapatkan nilai > 5 gram/kg bb, sehingga bahan dapat

digolongkan tidak beracun.

PENDAHULUAN

Pada saat ini pengembangan obat anti tumor atau anti-

kanker yang berasal dari tanaman banyak digalakkan, meng-

ingat bahan obat asal tanaman tersebut banyak terdapat di

Indonesia. Salah satu bahan obat asal tanaman tersebut adalah

Scurulla atropurpurea (BI) Danser yang biasanya dikenal

dengan nama benalu teh.

Benalu teh (Scurulla atropurpurea (BI) Danser) adalah

tumbuhan yang hidupnya menumpang pada tumbuhan teh dan

menghisap makanan dari tumbuhan inang untuk kelangsungan

hidupnya. Tanaman ini digunakan oleh sebagian masyarakat

yang tinggal di daerah di Indonesia sebagai obat anti tumor

atau antikanker

(1)

. Daun dan batang tanaman ini mengandung

senyawa alkaloid, flavonoid, glikosida, triterpen, saponin dan

tanin

(2,3)

Di Eropa dan Amerika ada jenis tanaman misalnya Viscum

album L. yang dipakai untuk mengobati tumor atau kanker.

Penelitian yang pernah dilakukan tanaman tersebut bersifat

imunostimulator yaitu, melalui pengaktifan sel granulosit dan

makrofag, yang memberi sifat anti tumor

(4)

, mungkin benalu

teh mempunyai sifat tersebut dengan mekanisme imuno-

stimulator yang lain yaitu meningkatkan konsentrasi lg G.

Tumor atau neoplasma adalah suatu pertumbuhan jaringan

baru yang tidak normal akibat pertumbuhan sel-sel baru yang

terus menerus tanpa kontrol dan tidak berfungsi bagi tubuh.

Secara garis besar tumor dapat digolongkan menjadi 2 jenis,

yaitu : tumor jinak (benigna) dan tumor ganas (maligna)

(5,6)

Sampai sekarang penyakit kanker (tumor ganas) masih

merupakan masalah dalam bidang kesehatan di Indonesia,

dengan angka kematian yang terus meningkat, yaitu 1,4%

tahun 1972 menjadi 4,3% pada tahun 1986 dan 4,4% pada

tahun 1992

(7,8,9)

Cermin Dunia Kedokteran No. 127, 2000 11

Ada teori yang menyatakan dalam pembentukan antigen

tumor invivo dilibatkan respon imun humoral maupun seluler.

Respon antibodi terhadap tumor memerlukan bantuan efektor

imun yang lain seperti makrofag dan Natural Killer (NK).

Sampai saat ini belum ada bukti antibodi secara sendiri dapat

menghambat perkembangan atau pertumbuhan sel tumor,

kecuali bukti penelitian invitro terhadap beberapa jenis sel

tumor yang dapat dilisiskan oleh antibodi

(10,11)

Imunoglobulin merupakan salah satu fraksi protein dalam

darah yang diproduksi sebagai reaksi terhadap berbagai rang-

sang antigenik yang diproduksi oleh limfosit B dan berperan

dalam kekebalan humoral. Kerja sama imunoglobulin dengan

sel NK terjadi karena sel NK memiliki reseptor Fc lg G. Bila

imunoglobulin G (lg G) mengikat antigen berupa protein pada

permukaan sel tumor yang disebabkan oleh virus, lg G melapisi

permukaan sel tumor, maka terjadi tumorosida. Peran lg G

sangat penting karena aktivitas sel NK terhadap antigen tumor

sangat rendah

(10,11)

Tujuan penelitian ini untuk menambah dan melengkapi

informasi mengenai benalu teh sebagai obat tumor atau kanker

yaitu dengan melihat aktivitas lg G pada mencit putih dengan

metode Uji difusi gel kuantitatif.

BARAN DAN CARA

a. Bahan dan Alat Penelitian

1) Bahan

Tanaman atau bagian tanaman yang diteliti ialah herba

Scurulla atropurpurea (BI.) Danser., yang dikumpulkan dari

daerah Probolinggo Jawa Timur dan telah dideterminasi, di

Herbarium Bogoriensis, Bogor.

2) Percobaan Toksisitas akut (LD

)

Tikus galur Sprague Dawley jenis kelamin jantan dan

betina dengan berat 150-180 gram (40 ekor).

Natrium klorida

Akuades

Kapas steril

Sonde lambung

3) Penelitian aktivitas sistem imun

Mencit galur C

H jenis kelamin jantan dengan berat

18-23 gram (50 ekor)

Akuades

Buffer Saline Phosphat

EDTA

Lempeng agar imunodiffusion

Immuno viewer

Micrometer pipet

Pipet tips

Capillary tube dengan heparin

Micro tube centrifuge

Sonde lambung

b. Rancangan Penelitian

Rancangan penelitian yang digunakan adalah Rancangan

Acak Lengkap dengan 10 pengulangan, untuk melihat peng-

aruh pemberian infusum benalu teh terhadap berat limpa pada

minggu ke 2. Rancangan petak terbagi (split spot) terdiri dari 2

faktor, melihat pengaruh pemberian infusum benalu terhadap

konsentrasi lg G, dari minggu 0 sampai minggu ke-2.

c. Cara Kerja

1) Pembuatan infus benalu teh

Pengolahan bahan tanaman benalu teh dengan cara di-

keringkan dengan sinar matahari dan dalam lemari pengering

dengan suhu tidak lebih dari 50° C sampai mendapatkan bobot

yang konstan. Bahan digiling dan diayak dengan menggunakan

ayakan Mesh 48, serbuk benalu dibuat infus sesuai Farmakope

Indonesia

(12)

2) Pembuatan suspens antigen

Sel darah merah domba (SDMD), dipisahkan dari plasma

dengan pemusingan 1500 rpm. Plasma dikeluarkan kemudian

dilakukan pencucian dengan larutan buffer saline phosphat

(BSP) dengan pH 7,2. Pencucian dilakukan paling sedikit tiga

kali. Setelah pencucian selesai BSP dibuang, sehingga diper-

oleh suspensi SDMD 100%. Ke dalam suspensi SDMD 100%

ditambahkan PBS dengan volume yang sama, sehingga

didapatkan suspensi SDMD 50% menjadi 1% dengan

penambahan BSP.

3) Percobaan LD

cara Thompson-Weil

(13)

Tikus diberi dosis obat dalam bentuk infus dengan sonde

lambung. Dosis ditentukan dari percobaan pendahuluan dan

kematian diobservasi selama 2 minggu. Pada hari terakhir

pengamatan, semua hewan coba didekapitasi dan dilakukan

pemeriksaan makroskopik. Bila terdapat kelainan organ dalam,

dicatat dan diperiksa secara mikroskopik.

4) Penelitian aktivitas sistem imun

Lima puluh ekor mencit jantan galur C

H, dengan berat

badan 20-30 gram, dibagi secara acak menjadi 5 kelompok

diperlakukan dengan sepuluh ulangan (berdasarkan rumus

Federer). Kelompok I mendapatkan akuades dan suntikan sus-

pensi SDMD 1 % intraperitoneum; Kelompok II mendapatkan

infus dengan dosis 15 mg/100 g dan suntikan suspensi SDMD

1 %; Kelompok III mendapatkan infus dengan dosis 75 mg/100

dan suntikan suspensi SDMD 1 %; Kelompok IV mendapatkan

infus dengan dosis 150 mg/100 g dan suntikan suspensi SDMD

1%; Kelompok V mendapatkan infusum dosis 1500 mg/100 g

dan suntikan suspensi SDMD 1 %. Bahan percobaan diberikan

secara oral setiap hari, selama 7 hari dan tiap kelompok men-

dapat makanan dan minuman adlibitum. Satu minggu sebelum

bahan obat dan suntikan SDMD diberikan, dilakukan peng-

ambilan darah lewat vena orbitalis, kemudian diulang peng-

ambilannya 1 minggu setelah pemberian obat dan 2 minggu

setelah pemberian obat pertama. Pemisahan serum darah di-

lakukan dengan cara disentrifus pada 3000 rpm selama 10

menit. Serum yang diperoleh langsung diukur kadar imunoglo-

bulinnya untuk penelitian

(13)

d. Pengamatan

1) Pengukuran konsentrasi imunoglobulin G (lg G)

Ke dalam sumuran imunodifusi radial yang masing-masing

mengandung anti lg G mouse, dengan mikro pipet dimasukkan

µl serum. Pengukuran diameter presipitasi dilakukan pada

hari ketiga menggunakan alat immunoviewer

(10)

2) Pengamatan berat limpa

Cermin Dunia Kedokteran No. 127, 2000

Pada akhir percobaan mencit dibius dengan menggunakan

eter, dilakukan pembedahan dari bagian inguinal sampai

torakal untuk mengangkat limpa, sisa cairan yang menempel

pada organ dihisap dengan kertas saring. Berat limpa ditimbang

menggunakan timbangan analitik merk Sartorius.

e. Analisis data

1) Analisis data toksisitas akut (LD

dilakukan menurut

metode Thompson-Weil dengan batas kepercayaan 95%.

2) Analisis data aktivitas sistem imun dilakukan :

Bila data yang didapat distribusinya normal dilakukan

uji parametrik dengan anova 2 way

(11,12)

Bila data yang didapat distribusinya tidak normal di-

lakukan uji dengan Friedman dan dilanjutkan dengan

uji berganda

(11,12)

HASIL PENELITIAN

1) Uji toksisitas akut (LD

)

Pemberian infusum benalu teh dengan dosis tertinggi yang

dapat diberikan pada tikus, selama 14 hari pengamatan, tidak

menimbulkan kematian ataupun tanda-tanda intoksikasi, serta

tidak menimbulkan perubahan tingkah laku maupun bobot

badan. Pengamatan makroskopik tidak menunjukkan adanya

penyimpangan morfologi pada organ hati, ginjal, limpa, paru

dan jantung. Dengan demikian didapatkan harga LD

> 5

gram/kg bb, sehingga dapat digolongkan bahan termasuk

kategori tidak beracun

(14)

2) Penelitian aktivitas sistem imun

a) Pengukuran konsentrasi Imunoglobulin G (lg G)

Pemberian infus benalu teh pada semua dosis, setelah

diimunisasi dengan sel darah merah domba terlihat kenaikan

konsentrasi lg G pada setiap minggunya (Tabel 1). Perhitungan

uji normalitas dan homogenitas kadar lg G hewan perlakuan

dan kontrol memperlihatkan distribusi normal dan sebaran

yang homogen. Berdasarkan hal tersebut maka dilakukan per-

hitungan analisis uji parametrik anova 2 way

(14)

Pada uji statistik tersebut tidak terdapat perbedaan nyata

antar dosis perlakuan (P>0,01). Bila dilihat pola perkembangan

lg G minggu ke-0,1 dan 2 terdapat perbedaan sangat nyata pada

P<0,01. Pengujian dengan regresi Poli/nominal Orthogonal

terhadap pola perkembangan lg G minggu ke-0,1, dan 2 pada

dosis 15, 75, 1500 mg/100 g bb. dan akuades umumnya mem-

punyai pola perkembangan yang sama (regresi mendatar),

namun pada dosis 150 mg/100 g bb. menunjukkan pola

perkembangan yang meningkat (regresi linier) dengan

persamaan garis Y = 265,13 + 97X, dengan peningkatan kon-

sentrasi 97,0 mg/dl (Gambar 1).

b) Berat limps

Pengukuran berat relatif limpa (berat limpa per bobot

badan akhir) disajikan dalam tabel 3. Bila dilihat kelompok per

kelompok, maka kelompok akuades menunjukkan berat relatif

limpa yang besar, yaitu 15,8 mg disusul Dosis 1, Dosis 2, Dosis

4 dan Dosis 3. Pada uji homogenitas dan normalitas mem-

perlihatkan data mempunyai distribusi tidak normal dan sebar-

an yang tidak homogen. Berdasarkan hal tersebut dilakukan uji

non-parametrik Krusal-Wallis dari uji statistik tersebut berat

relatif limpa dari 5 kelompok perlakuan tidak berbeda nyata

(P>0,05) (Tabel 2).

Tabel 1. Hasil pengukuran rata-rata konsentrasi 1gG (dalam mg/dl).

Dosis Waktu

Rata-rata

Minggu 0

Minggu 1

Minggu 2

452,0

± 127,32

485,0

± 87,23

527,7

± 112,99

Minggu 0

Minggu 1

Minggu 2

472,7

± 126,81

601,8

± 183,25

523,2

± 230,65

Minggu 0

Minggu 1

Minggu 2

366,7

± 167,71

450,0

± 117,52

560,7

± 148,01

Minggu 0

Minggu 1

Minggu 2

435,6

± 59,93

443,8

± 100,39

452,2

± 96,86

Akuades

Minggu 0

Minggu 1

Minggu 2

429,9

± 120,83

507,3

± 153,16

500,3

± 109,26

Keterangan :

D1 = Dosis infusum benalu teh 15 mg/100 g bb.

D2 = Dosis infusum benalu teh 75 mg/100 g bb.

D3 = Dosis infusum benalu teh 150 mg/100 g bb.

D4 = Dosis infusum benalu teh 1500 mg/100 g bb.

Akuades = akuades 0,3 ml/10 g bb.

Gambar 1. Persamaan regresi hubungan pemberian infus benalu teh

dosis 150 mg/100 g dengan peningkatan konsentrasi lgG.

PEMBAHASAN

Tanaman benalu teh (Scurulla atropurpurea (BI) Danser)

secara empirik digunakan untuk mengobati penyakit tumor atau

kanker. Aktifitasnya sebagai obat antitumor atau antikanker

mungkin secara tidak langsung yaitu rnelalui pengaktifan

sistem kekebalan tubuh dengan mengukur konsentrasi lgG.

Pemakaian bahan sebagai obat anti tumor atau kanker me-

nimbulkan dugaan bahwa bahan bersifat imunostimulator yaitu

Cermin Dunia Kedokteran No. 127, 2000 13

Tabel 2. Berat relatif limpa mencit pada akhir percobaan.

Ulangan

Perlakuan

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Jumlah Rata-rata

Dosis 1

0,186 0,055 0,061 0,089 0,199 0,313 0,258 0,154 0,073 0,088

147,6

14,8

± 0,09

Dosis 2

0,082 0,500 0,209 0,278 0,970 0,940 0,570 0,580 0,075 0,081

108,1 10,8

± 0,075

Dosis 3

0,052 0,084 0,058 0,082 0,100 0,068 0,096 0,073 0,045 0,055

71,2

7,1

± 0,019

Dosis 4

0,151 0,075 0,070 0,069 0,137 0,070 0,248 0,052 0,090 0,055

101,7 10,1

± 0,061

Akuades 0,056

0,064

0,089

0,060 0,205 0,148 0,061 0,051 0,043 0,022

158,4 15,8

± 0,084

dapat meningkatkan konsentrasi lgG. Hasil pengujian pem-

berian infusum benalu teh pada semua dosis perlakuan tidak

memperlihatkan adanya peningkatan konsentrasi lgG (P>0,01),

dengan pembanding akuades, tetapi pada dosis 150 mg/100 g.

bobot badan terjadi kecenderungan peningkatan konsentrasi

lgG. Sehingga dapat dikatakan infus benalu teh pada dosis

tersebut di atas dapat dikatakan bersifat imunostimulator yaitu

peningkatan konsentrasi lgG. Kemungkinan diantara senyawa-

senyawa imunostimulator. Wagner (1985) secara umum

menyebutkan golongan terpenoid, alkaloid atau polifenol mem-

punyai sifat imunostimulator.

Pengamatan terhadap berat relatif limpa, tidak terjadi

perubahan pada berat limpa pada semua dosis perlakuan,

sehingga tidak dapat ditarik kesimpulan dari pengamatan

tersebut.

KESIMPULAN

Infusum benalu teh (Scurulla atropurpurea (Bl) Denser)

merupakan bahan yang tidak toksik dengan LD

>5 gram/kg

bobot badan.

Pengaruhnya terhadap konsentrasi lgG tidak berbeda nyata

antar dosis perlakuan (P>0,01), tetapi pada pengamatan kon-

sentrasi lgG tiap minggu terlihat pola perkembangan yang

meningkat, dengan peningkatan konsentrasi 97,0 mg/dl.

UCAPAN TERIMA KASIH

Ditujukan kepada Kepala Puslitbang Farmasi, Badan Litbangkes Depkes

RI. serta seluruh staf KPPOT yang telah memberikan saran dan bantuannya

sejak perencanaan sampai selesai penelitian.

KEPUSTAKAAN

Sudarman Mardisiswojo, Harsono Rajakmangun S. Cabe Puyang Warisan

Nenek Moyang. 2 Balai Pustaka Jakarta, Jakarta.

Chairul, dkk. Skrining Fitokimia dan Analisis Komponen Kimia ekstrak

batang Benalu Teh (Scurulla atropurpurea (Bl) Dans). Dibawakan dalam

Seminar Nasional ke-IX. Penggalian, Pelestarian, Pengembangan dan

Pemanfaatan Tumbuhan Obat : Secang dan Benalu. Yogyakarta, 21-22

September 1995.

3. IGP. Santa. Studi Kemotaksonomi-Farmakognasi Benalu Antikanker

(Scurulla atropurpurea (B1.) Denser & Dendophtroe pentandra (L) Miq.

Dibawakan dalam Seminar nasional ke-IX. Penggalian, Pelestarian,

Pengembangan den Pemanfaatan Tumbuhan Obat : Secang dan Benalu.

Yogyakarta, 21-22 September 1995.

Wagner, Hildebert. Immunostimulants of Fungi and Higher Plants, 1984.

5. Achmad Tjarta, Sutisna Himawan : Kumpulan Kuliah Patologi. Bag.

Patologi Anatomik FK. UI.

Departemen Kesehatan RI. Survei Kesehatan Rumah Tangga, 1972.

Departemen Kesehatan RI. Survei Kesehatan Rumah Tangga, 1986.

8. Departemen Kesehatan RI dan Biro Pusat Statistik. Survei Kesehatan

Rumah Tangga, 1992.

Abbas AK, Lictman AH, Pober JS. Cellular and Molecular Immunology

Saunders Co. Philladelphia, 1991.

11. Rott IM. Essential Immunology. Blackwell Science Publ. Oxford, 1991.

12. Departemen Kesehatan RI. Farmakope Indonesia, 1979.

13. Mohamad Sadikin dkk. Vitamin A dan Imunitas : 3. Peningkatan Titer

Antibodies Tikus Anti Sel Darah Merah Domba oleh Pemberian Vitamin

A secara Oral, MKI 1995; 45 (7).

14. Sudjana. Metode Statistilk. Tarsito Bandung

Exercise the muscles well, but spare the nerves always

(Schopenhauer)

Cermin Dunia Kedokteran No. 127, 2000